[发明专利]一种棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净的纯化方法，属于药物合成精制技术领域。

背景技术

近年来，由于器官移植手术导致免疫抑制剂的大量使用、化疗以及更具侵袭性的医疗方法的应用、艾滋病的蔓延、广谱抗菌药物的滥用等原因，免疫系统受到抑制的人群不断增多，真菌感染的发病率显著升高，尤其是深部真菌感染的发病率和致死率逐年增加。同时，随着抗真菌药物的运用，真菌的耐药性也越来越强，使得抗真菌药物的应用有迅猛增加的趋势。因此，抗深部真菌感染的药物已成为抗感染药的研究热点之一，日益引起人们的关注。

棘白菌素（echinocandins），又称棘球白素，是21世纪初开发的新型药物，具有全新的作用机理，抗真菌谱较广，对念珠菌属以及曲霉菌属均有效，无交叉耐药性，无因其本身作用机制而引发的明显不良反应，是目前用于治疗全身性真菌感染的新型药物。

棘白菌素属于乙酰六环类，为葡聚糖合成酶抑制剂。葡聚糖是一种真菌细胞壁多糖，是细胞壁的重要成分，能够使细胞壁保持完整性并使其渗透压保持稳定，棘白菌素能够非竞争性地抑制β-(1,3)-D-葡聚糖的合成，破坏细胞壁的完整性，进而发挥杀菌作用。由于哺乳动物的细胞无细胞壁，因此本药物对人体无伤害，副作用小，安全系数较高。

阿尼芬净（anidulafungin）是第三代棘白菌素类的半合成抗真菌药，是棘白霉素B的衍生物，由从真菌构巢曲霉产生的环六肽类化合物——棘白菌素B与合成得到的边链对接而成。该药由美国Vicuron制药公司研制，2004年5月24日通过FDA的临床申请，并于2006年12月在美国首次上市，适用于下列真菌感染：①念珠菌血症及其他类型的念珠菌感染（腹腔脓肿、腹膜炎）；②食管念珠菌病。由于阿尼芬净不经过肝代谢和肾清除，使得联合用药以及肝、肾功能不良患者无需调整剂量成为可能，且用药安全，耐受性好，具有广阔的市场前景。

阿尼芬净的分子式为C₅₈H₇₃N₇O₁₇，分子量为1140.24，其结构式如下：

阿尼芬净是一种白色或类白色粉末，易溶于N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜，可溶于二氯甲烷-甲醇、氯仿-甲醇、乙腈-水、丙酮-水等混合溶剂中，微溶于乙醇、甲醇、四氢呋喃，不溶于水。在国外专利WO9527074、US5541160、WO9508341中，公开了使用制备高效液相色谱对阿尼芬净进行纯化的方法，采用DELTA PAK C18色谱柱，采用乙腈/水溶液为洗脱剂（亦称流动相），梯度洗脱比例为40:60至55:45，紫外吸收波长为210nm和277nm。但是，该方法使用的设备昂贵，处理样品少，纯化分离时间长，且后处理困难，开发成本高，目前仍无法实现工业化放大生产。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是提供一种工艺简单、操作简便、所用溶剂毒性低、产品纯度高、适用于工业化生产的棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净的纯化方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净的纯化方法，按以下步骤顺序进行：

（1）制备干样：向棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净粗品中加入有机溶剂溶解，充分溶解后加入硅胶，搅拌均匀后干燥，制得阿尼芬净硅胶干样；

（2）加压洗脱：将阿尼芬净硅胶干样均匀填在装有硅胶的层析柱顶端，加入洗脱溶剂进行加压洗脱，用高效液相色谱进行监测，收集阿尼芬净含量大于98%的洗脱液；

（3）浓缩：将阿尼芬净含量大于98%的洗脱液浓缩至干，得到含量大于98%的棘白菌素类抗真菌药阿尼芬净纯品。

本发明的进一步改进在于：所述步骤（1）中使用的有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、乙腈、丙酮、甲醇、乙醇中的任意一种或任意两种的混合溶剂。

本发明的进一步改进在于：所述步骤（1）中硅胶的加入重量为阿尼芬净粗品重量1～3倍。

本发明的进一步改进在于：所述步骤（2）中层析柱的高径比为8:1～18:1。

本发明的进一步改进在于：所述步骤（2）的层析柱中填装的硅胶重量为阿尼芬净粗品重量的20～30倍。

本发明的进一步改进在于：所述步骤（1）和步骤（2）中使用的硅胶为球形硅胶或不定型硅胶，硅胶粒度为100目～400目。