[发明专利]一种地衣芽孢杆菌7172及其应用

权利要求书

1.一种地衣芽孢杆菌，其分类命名为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）7172，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.7172，保藏日期2013年1月18日，保藏地址中国北京。

2.权利要求1所述的地衣芽孢杆菌在生物转化阿魏酸生产天然香兰素中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）斜面培养：将地衣芽孢杆菌7172接种到斜面培养基上，在50℃、pH7条件下，静置培养24h；

（2）制备种子培养液：用步骤（1）所得到的斜面培养物，接种到种子液培养基中，在50℃条件下，200rpm振荡培养24h，连续转接1～3次，制得种子培养液；

（3）菌体的发酵培养：使用步骤（2）所得的种子培养液，按体积百分比1%的接种量接入发酵培养液中，在50℃条件下，200rpm振荡培养20h；

（4）菌体的收集：将步骤（3）所得到的发酵液在6000rpm的条件下离心，弃上清，得到沉淀物，即菌体；

（5）菌体的转化：将步骤（4）所得的菌体用磷酸盐缓冲液冲洗三次，再用相同的磷酸盐缓冲液进行悬浮培养，同时加入8g/L的阿魏酸钠溶液，在50℃条件下，200rpm振荡培养5d，获得天然香兰素。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述斜面培养基配方为：酵母提取物 5g/L，Tryptone 10g/L，氯化钠 5g/L，琼脂18g/L。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述种子液培养基配方为：酵母提取物5g/L，Tryptone 10g/L，氯化钠 5g/L。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述发酵培养基配方为：酵母提取物 5g/L，Tryptone 10g/L，氯化钠 5g/L；pH调至7。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液的成份为：4.2mM Na₂HPO₄，2.2mM KH₂PO₄，0.9mM NaCl，1.9mM NH₄Cl，pH为7。

8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的阿魏酸钠溶液是将阿魏酸溶于磷酸盐缓冲液中，再用NaOH调节pH至7。