[发明专利]含有天然胆固醇和赖氨酸类脂质阳离子有机功能分子及其脂质体、制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及合成脂质体基因输送功能载体材料领域，特别涉及一种由天然胆固醇和赖氨酸合成的类脂质阳离子有机功能分子及其脂质体的制备方法及其作为小分子干扰RNA(SiRNA)转染试剂的应用。 

背景技术

目前，基因治疗(Gene Therapy)已经成为生物医学工程研究与应用领域的新兴研究热点，其核心是将具有一定治疗作用的基因片段通过基因输送途经导入人体靶细胞中进行表达，以纠正致病的基因缺陷，从而达到治疗疾病的目的。这些导入的治疗基因包括DNA、RNA等，其中基于小分子干扰RNA(SiRNA)技术的基因治疗方法近年来引起了人们的极大兴趣。与传统的DNA基因治疗相比，其方法优点在于：SiRNA无需穿越核膜屏障进入目标细胞核内进行整合表达，在细胞质中就能方便、快速、且特异性与信使RNA(mRNA)结合，进而抑制结合mRNA的翻译表达，起到基因调控和治疗的效果；另一方面，SiRNA可由人工合成制备得到，有利于其有效基因序列的筛选和优化，由于其起效快，在治疗过程中SiRNA给药的时间间隔也灵活可控。因此，通过SiRNA输送进行基因治疗的相关技术近年来得到了迅速的发展，而促使SiRNA基因高效输送的相关功能载体材料的研究成为生命科学和材料科学交叉领域最为活跃的研究方向之一。 

据国内外已有的研究报道，病毒以外作为SiRNA基因输送的载体大多为合成阳离子有机功能分子、高分子，其实现基因负载与输送的原理为利用载体阳离子功能分子、高分子中质子化氨基官能团的正电荷(+)与SiRNA基因序列中磷酸基团所携带的负电荷(-)的静电相互作用，结合组装形成稳定的聚集体纳米复合物粒子(Polyplex)，保护所负载的SiRNA不易被细胞内外的核酸酶降解，同时可提高聚集复合体粒子在 体内的稳定性，从而实现提高SiRNA基因转染的效率。然而，到目前为止，虽然国内外已经开发报道了多种阳离子功能分子如阳离子聚合物、阳离子脂质体等，并作为载体应用于体外或体内细胞/组织水平的SiRNA输送与转染研究，但仍然存在着一系列科学和技术问题，如大多数脂质阳离子功能分子在血液循环环境中不稳定，容易被网状内皮系统吞噬后被肝、脾等器官清除。同时，在脂质阳离子介导的SiRNA基因输送研究中发现，许多阳离子聚合物具有免疫原性，刺激、诱导细胞的免疫应急反应，从而导致毒副作用。以上这些因素限制了阳离子功能分子在SiRNA基因治疗中的进一步应用。因此，如何改善合成基因载体的生物相容性、减低毒性及增强SiRNA基因的输送与转染效果，具有重要的研究和实用价值。