[发明专利]一种快速、灵敏的检测血液中丙戊酸钠的方法

说明书

技术领域

本发明公开了一种快速、灵敏的检测血液中丙戊酸钠的方法。本方法以离子迁移谱技术为基本检测技术，利用离子迁移谱仪作为检测手段，采用负离子高压模式，卤素灯热解析进样方式，无任何溶剂提取前处理方法。发明中的装置稳定、可靠，方法简便、速度快、高效。所建立的定性、定量分析方法满足医生对癫痫病人的人体给药浓度分析范围（50-100mg/L）。本发明中的检测方法可广泛用于临床给药深度分析，指导临床医生精准用药。

背景技术

丙戊酸钠是抗癫痫药物，其作用机理尚未完全阐明。实验见本品能增加GABA的合成和减少GABA的降解，从而升高抑制性神经递质γ-氨基丁酸（GABA）的浓度，降低神经元的兴奋性而抑制发作。在电生理实验中见本品可产生与苯妥英相似的抑制Na⁺通道的作用。对肝脏有损害。口服胃肠吸收迅速而完全，约1～4小时血药浓度达峰值，生物利用度近100%，有效血药浓度为50～100μg/mL。血药浓度约为50μg/mL时血浆蛋白结合率约94%；血药浓度约为100μg/mL时，血浆蛋白结合率约为80～85%。血药浓度超过120μg/mL时可出现明显不良反应。随着血药浓度增高，游离部分增加，从而增加进入脑组织的梯度（脑液内的浓度为血浆中浓度的10～20%），T_1/2为7～10小时。主要分布在细胞外液和肝、肾、肠和脑组织等。大部分由肝脏代谢，包括与葡萄糖醛酸结合和某些氧化过程，主要由肾排出，少量随粪便排出及呼出。能通过胎盘，能分泌入乳汁。

成人常用量：每日按体重15mg/kg或每日600～1200mg分次2～3次服。开始时按5～10mg/kg，一周后递增，至能控制发作为止。当每日用量超过2500mg时应分次服用，以减少胃肠刺激。每日最大量为按体重不超过30mg/kg、或每日1.8～2.4g。小儿常用量：按体重计与成人相同，也可每日20～30mg/kg，分2～3次服用或每日15mg/kg，按需每隔一周增加5～10mg/kg，至有效或不能耐受为止。

丙戊酸钠血药浓度大于100mg·L^-1时，毒副作用增加而疗效无明显增加。现报道有关丙戊酸钠的不良反应，根据作用机制分类，主要有以下几个方面:通过抑制腺苷酸环化酶引起镇静，损害认知和驾驶能力，引起甲状腺功能减退、体质量增加、牛皮癣和脱发;通过拟5-羟色胺引起消化道反应;通过抗肉碱效应引起肝损害和高血氨症;通过升高甲状旁腺素促进骨吸收，引起胰管结石并以此诱发胰腺炎;通过抗细胞增殖效应抑制造血，抑制精子发育和精子能动性;通过引起变态反应导致罕见致死性肝坏死和嗜酸性粒细胞增多性胸腔积液;丙戊酸钠具生殖不良反应，引起多囊卵巢综合症和致畸效应。

由于丙戊酸钠的治疗剂量范围窄，疗效及毒性与血药浓度关系密切，且患者间个体差异很大，因此对其体内血药浓度进行监测十分必要。高效液相色谱法，丙戊酸钠不具有芳香环或共轭双键结构，在紫外光下无吸收，一般HPLC法不能直接经紫外检测器监测。因丙戊酸钠分子结构中缺乏有效的紫外吸收，采用紫外检测的高效液相色谱法测定其血药浓度时灵敏度较低且干扰因素多，所以大多采用荧光检测的方法，但检测条件要求比较高。荧光偏振免疫法，荧光偏振免疫法主要依托于TDx-FLx荧光偏振免疫分析仪，取血清后，采用美国雅培的丙戊酸钠试剂盒即可简便、快速地完成血药浓度测定，但TDxFLx荧光偏振免疫分析仪成本较高，基层医疗机构难以开展。对临床上常用于同时治疗。用气相色谱法检测癫痫病的药物(苯妥英钠、卡马西平、丙戊酰胺、安定、苯巴比妥钠)，取最高有效血药浓度，进行干扰实验，所得色谱图与空白血清色谱图完全一样，未检测到任何色谱峰。

离子迁移谱（Ion Mobility Spectrometry，IMS）技术20世纪70年代出现的一种快速分离检测技术，与传统的质谱、色谱仪器相比，具有结构简单，灵敏度高，分析速度快，结果可靠的特点。能够在大气环境中对微量物质进行检测，适于现场使用。目前我们研究的IMS已经广泛应用在化学战剂、毒品、爆炸物探测、环境监测、有毒气体监测、火灾监测、水污染监测和食品监测等领域。通过迁移时间就可确定分析目标物质的存在，而应用峰面积或峰高可确定相应物质的浓度。

发明内容

本发明涉及一种快速、灵敏的检测血液中丙戊酸钠的方法，检测装置为离子迁移谱仪，卤素灯热解析进样薄片上含丙戊酸钠药物的血液样品，载气将样品蒸汽送入到离子迁移谱迁移管内进行分析检测。具体如下：