[发明专利]乳球菌谷氨酰胺合成酶基因、其编码蛋白及其克隆方法无效
| 申请号： | 201310130492.1 | 申请日： | 2013-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN103205441A | 公开（公告）日： | 2013-07-17 |
| 发明（设计）人： | 朱晨光;沈春磊;王伟;邢莹莹;徐腾蛟;唐远平;梅冰;宋任涛 | 申请（专利权）人： | 上海大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N9/00;C12N15/63;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/01;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海上大专利事务所(普通合伙) 31205 | 代理人： | 陆聪明 |
| 地址： | 200444*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 球菌 谷氨酰胺 合成 基因 编码 蛋白 及其 克隆 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种乳球菌谷氨酰胺合成酶基因，其特征在于该基因的序列为SEQ ID NO.1所示的碱基序列。
2. 一种根据权利要求1所述的基因编码的蛋白，其特征在于该蛋白的序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
3. 一种重组表达载体，该重组载体含有根据权利要求1所述的基因。
4. 一种宿主细胞，该宿主细胞含有根据权利要求3所述的重组载体。
5.一种克隆根据权利要求1所述的乳球菌谷氨酰胺合成酶基因的方法，其特征在于该方法的具体步骤为：参考NCBI数据库中的乳球菌的谷氨酰胺合成酶基因序列，设计了兼并引物，从土壤微生物宏基因组DNA中PCR扩增得到不枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶基因；所述的兼并引物为：LactocF: 5’-ATGACAATCACAGCAGCAGA-3’和LactocR: 5’-TTARTAAAGTTCTAARTART-3’。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的PCR扩增的条件为： 94℃ 5分钟；94℃ 50秒，45℃ 50秒，72℃ 1分30秒，25个循环；72℃ 8分钟。
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