[发明专利]一种β2-受体激动剂酶联免疫试剂盒及其使用方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于检测试剂盒领域，涉及瘦肉精检测试剂盒，尤其是一种β₂-受体激动剂酶联免疫试剂盒及其使用方法和应用。

背景技术

近年来，随着畜牧业的发展，兽药的使用也日益广泛，已逐渐成为不可缺少的物质基础之一。包括β₂-受体激动剂在内的兽药在促生长、提高饲料转化率和利用率以及改善产品品质等方面确实起到了十分显著的作用。然而，在促进畜牧业发展的同时，兽药的使用无疑会导致药物本身及其代谢产物在动物体内的滞留或蓄积，并以残留的方式进入人体及生态系统，从而造成危害。动物源性食品安全问题，特别是滥用或非法使用兽药及违禁药品，使畜禽类产品残留兽药的问题日益突出，给人民健康造成了很大的威胁，并且已成为畜牧业发展的一个主要矛盾。随着我国加入世界贸易组织，今后发达国家低价格、低残留的动物源性食品势必大量涌入我国。如果不积极采取有效措施，不但我国的动物源性食品出口不畅，而且连在国内市场的地位也会受到严重冲击，将非常不利于养殖业的健康发展。

β₂-受体激动剂，又称为β₂-兴奋剂，是一类人工合成苯乙胺类药物，常见的有克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、拉贝特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁等。β₂-受体激动剂具有促进肌肉生长、减少脂肪沉积、改善肉质作用，因此有一些饲料生产商与家畜生产者违禁使用该药品于家畜养殖中。由于β₂-受体激动剂在动物体内有较长的残留时间和短期内产生较大的残留量，特别是内脏中蓄积残留，通过食物链进入人体，会使一些易感人群，如老人、孕妇、心脏机能较差者产生较明显的中毒症状，严重危害人类健康，欧美等国立法禁止在家禽生产上使用，我国农业部也于1997年作出相同的规定。但在经济利益的驱使下，各国违法滥用现象仍较普遍。1990年至1995年间意大利、法国和西班牙因食品克伦特罗污染发生的中毒事件超过500余起，我国也发生过中毒事件。

为了保障我国动物食品的安全性，保护公众健康安全，建立有效快速的定量确证方法十分必要。

1.1β₂-受体激动剂的结构

β₂-受体激动剂具有苯乙醇胺结构母核，苯环上连接有碱性的β-羟胺（仲胺）侧链，侧链的取代基通常为N-叔丁基、N-异丙基或N-烷基苯，能与无机酸或有机酸成盐。常见的有克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、拉贝特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁。其基本结构为：

按照苯环上取代基的差异，可将β₂-受体激动剂分为苯胺型和苯酚型。苯胺型结构中具有芳伯胺基，中等极性，芳伯胺基常被用于衍生化分析。典型的药有克伦特罗，其结构为：

苯酚型一般具有邻(间）苯二酚或苯酚结构，在C-3’、C-5’位上含有1或2个酚羟基。苯酚型又可以分为邻苯二酚（儿茶酚型，如肾上腺素），间苯二酚（雷索酚型，如非诺特罗、特布它林、异丙喘宁），水杨醇型（典型的药物有沙丁胺醇），其结构如下：

非诺特罗的结构为：

特布他林的结构为：

异丙喘宁的结构为：

β₂-受体激动剂属于拟肾上腺素药物，它可与靶组织细胞膜β₂-受体结合，激活腺苷酸环化酶，催化三磷酸腺苷转化为环一磷酸腺苷，从而诱发一系列酶的磷酸化过程和生理效应。β₂-受体激动剂的生理效应：1）松弛支气管、子宫和肠壁平滑肌，增加心率。医学或兽医临床上主要用于扩张支气管和增加肺气量，可治疗支气管哮喘、阻塞性肺炎、平滑肌痉挛和休克等症，也用做牛、马产道松弛剂。2）再分配效应。β₂-受体激动剂可使多种动物（牛、猪、羊、家禽）体内营养成分由脂肪组织向肌肉组织转移，称为“再分配效应”，其结果是体内的脂肪分解代谢增强，蛋白质合成增加，能显著增重和提高饲料转化率。3）对神经系统的兴奋效应，因而可以作为一种运动兴奋剂。近年来，运动员使用该类药物的频率呈上升趋势。1992年国际奥委会开始将第一个β₂-受体激动剂克伦特罗列入了禁用药物表，在以后的几年里又陆续新增了几种该类药物。截至2004年1月，所有β₂-受体激动剂均已被禁用。

1.2β₂-受体激动剂的滥用及对人的副作用

1.2.1在动物饲养中的滥用