[发明专利]一种犬细小病毒乳胶检测试剂及检测方法和应用有效
| 申请号： | 201310127883.8 | 申请日： | 2013-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN104099298A | 公开（公告）日： | 2014-10-15 |
| 发明（设计）人： | 刘正飞;陈月平;史晓娜;周云朵 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;C07K16/08;G01N33/577;C12R1/91 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 细小 病毒 乳胶 检测 试剂 方法 应用 | ||
1.一种杂交瘤细胞，其特征在于：杂交瘤细胞27D， CCTCC NO：C201344。
2.权利要求1所述杂交瘤细胞分泌的抗体。
3.一种犬细小病毒乳胶检测试剂，其制备过程是：
取20μL羧化乳胶放入1.5EP管中；pH9.6, 0.1M碳酸盐缓冲液洗3遍，12000rpm，20min；再用pH4.7,0.01M的磷酸盐缓冲液洗3遍，12000rpm，20min；然后加入100mM的EDC100μL重悬，20mM的NHS100μL混匀， 23~27℃缓慢震摇4h；pH8.0，0.01M硼酸盐缓冲液洗3遍，12000rpm，20min；加入200μL稀释度为1:1~8的单克隆抗体室温作用3-8h致敏后，加入终止剂0.5M乙醇胺50μL终止反应，12000rpm，20min；用200μL贮存液重悬，4℃保存；
所述的抗体为杂交瘤细胞27D分泌获得，CCTCC NO：C201344；
所述贮存液由0.01M pH 7.4的PBS配置，含0.1%BSA、5%甘油、0.1%NaN3。
4.根据权利要求3所述的检测试剂，其在制备过程中致敏时间为3-4小时。
5.根据权利要求3所述的检测试剂，其在制备过程中单克隆抗体的稀释度为1:8。
6.权利要求3所述的犬细小病毒乳胶检测试剂在体外检测犬细小病毒中的应用。
7.权利要求3所述的犬细小病毒乳胶检测试剂在制备犬细小病毒检测试剂盒中的应用。
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