[发明专利]一种L-谷氨酸基因工程菌及其应用

权利要求书

1.一种L-谷氨酸基因工程菌，其特征在于，其是将谷氨酸生产菌中编码磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的pepc基因以及编码谷氨酸脱氢酶的gdh基因通过表达载体引入谷氨酸生产菌中进行串联表达所得到的重组菌。

2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述谷氨酸生产菌选自谷氨酸棒杆菌、天津短杆菌、北京棒杆菌、钝齿棒杆菌中的一种，所述表达载体为pXMJ19。

3.权利要求1或2所述的基因工程菌在生产L-谷氨酸上的应用。

4.一种生产L-谷氨酸的方法，其特征在于，将权利要求1或2所述的基因工程菌接种至发酵培养基中进行发酵，制得L-谷氨酸。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的配方为：葡萄糖70-90g/L，玉米浆3-6ml/L，豆饼水解液15-25ml/L，KCl0.5-2g/L，Na₂HPO₄·12H₂O0.5-2g/L，MgSO₄·7H₂O1-2g/L，MnSO₄·H₂O1-3mg/L，FeSO₄·7H₂O1-3mg/L，VB₁0.1-0.5mg/L，发酵培养基的pH值为7.0-7.4。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵为补料分批发酵。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述补料分批发酵具体包括：视所述发酵的发酵液中残留葡萄糖的情况来流加葡萄糖溶液，使发酵液中的葡萄糖浓度维持在1.0-2.0%。

8.如权利要求4-7中任一所述的方法，其特征在于，采用间隔升温方式控制所述发酵的温度，其中所述间隔升温具体包括：控制发酵的起始温度为34℃，并且自发酵开始后每间隔4h使发酵温度升高0.5℃。

9.如权利要求4-7中任一所述的方法，其特征在于，采用分段供氧方式控制所述发酵的发酵液中的溶氧浓度，其中所述分段供氧具体包括：控制所述基因工程菌在其生长延滞期至对数生长期后期发酵液中的溶氧浓度为15-25%，所述基因工程菌在其生长稳定期至发酵结束发酵液中的溶氧浓度≤10%。

10.如权利要求4-7中任一所述的方法，其特征在于，所述发酵还包括：流加一定浓度的氨水，使发酵液的pH维持在7.0-7.4。