[发明专利]硫酸软骨素钠的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及硫酸软骨素钠的制备方法。

背景技术

硫酸软骨素钠是从动物的喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织提取制得的硫酸化链状粘多糖钠盐。硫酸软骨素钠主要由N-乙酰半乳糖胺（2-乙酰胺-2脱氧-β-D-吡喃半乳糖）和D-葡萄糖醛酸的共聚物的硫酸酯钠盐，共聚物内己糖通过β-1，3及β-1，4糖苷键交替连接。

目前硫酸软骨素钠采用的是碱盐消化沉淀法，即软骨经碱化后，酶解、过滤后用酒精直接沉淀，按此方法生产硫酸软骨素钠含量低，重金属、含氮量、炽灼残渣超标，达不到《中国药典》2010年版标准及出口标准。

发明内容

为解决现有技术中硫酸软骨素钠含量低，重金属、含氮量、炽灼残渣超标的技术难题；从而达到《中国药典》2010年版标准及（USP）美国药典、（EP）欧州药典出口标准，本发明提供了一种硫酸软骨素钠的制备方法。

本发明所提供的硫酸软骨素钠的制备方法，包括以下步骤：

（1）酶解：向软骨原料中加入软骨重量1%～3.5%的食盐，用稀碱溶液调节pH值至8～11，加入软骨重量0.2～0.4%的碱性蛋白酶酶解1～3小时，再用盐酸调节pH值至7～8，升温至42～50℃，再加入软骨重0.4～0.6%的胰酶酶解2～5小时；酶解结束后用盐酸调节pH值至6～6.5，升温至80℃，静置冷却至50℃左右，过滤，得到滤液；

（2）树脂吸附：向所述步骤（1）得到的滤液中加入强碱性阴离子交换树脂，在搅拌状态下吸附1～5小时，后用纯化水漂洗树脂，得到漂洗后的吸附树脂；

（3）洗脱：将所述步骤（2）得到的漂洗后的吸附树脂用盐水进行洗脱，收集洗脱液；

（4）脱色：将所述步骤（3）得到的洗脱液用氢氧化钠调节pH值至8～10，升温至37～40℃，加双氧水静置氧化脱色，得到脱色后的溶液；

（5）超滤：将所述步骤（4）得到的脱色后的溶液进行超滤，得到超滤液；

（6）沉淀：将所述步骤（5）得到的超滤液用盐酸调节pH值至5.8～6.0，用质量百分比浓度为70%～75%的酒精沉淀3～6小时，得到硫酸软骨素钠沉淀；

（7）脱水干燥：将所述步骤（6）得到的硫酸软骨素钠沉淀用酒精脱水后离心，干燥，即得到硫酸软骨素钠。

在所述步骤（1）之前还包括将所述软骨原料进行预处理的步骤；所述预处理的方法为将所述软骨原料加水浸泡，升温至80℃，搅拌清洗直至将原料洗净。

所述步骤（1）中所述酶解温度为30～40℃，所述盐酸浓度为盐酸与水体积比是1：1。

所述步骤（2）中所述强碱性阴离子交换树脂的加入量为软骨原料质量的80%。

所述步骤（3）中所述盐水的质量百分比浓度为10%-15%；所述洗脱为两次洗脱，第一次洗脱中所述盐水与所述吸附树脂的质量比为1.5:1，洗脱时间为2-3小时；第二次洗脱中所述盐水与所述吸附树脂的质量比为1:1，洗脱时间为1-2小时。

所述步骤（4）中所述双氧水为所述洗脱液重量的0.2%-0.8%，所述脱色的时间为2小时。

所述步骤（7）中所述用酒精脱水之前还包括将所述硫酸软骨素钠沉淀用质量百分比浓度为80～85%的酒精浸泡的步骤。

所述步骤（7）中所述用干燥是采用真空干燥，温度50～70℃，压力550～750mm汞柱，干燥8～10小时。

采用本发明的制备方法制备得到的硫酸软骨素钠，产品干物质收率提高了2%，硫酸软骨素钠含量提高了10%，从而提升了产品附加值，降低了生产成本，提高了经济效益。

附图说明

图1为硫酸软骨素钠的制备工艺流程图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细描述。

实施例1、制备硫酸软骨素钠

一、按照以下步骤制备硫酸软骨素钠：

（1）原料预处理：将猪、牛喉骨、鼻中骨、气管等软骨组织投入洗料罐子中，加水浸泡，至全部淹没，升温至80℃左右，反复搅拌清洗，去掉肉渣、浮油、杂质，直至原料洗净。

将洗净的原料投入到消化罐中，加入纯化水至软骨完全淹没后加热煮料，待煮沸后，应关小蒸汽，微开焖油2小时。待原料煮好后，打尽浮油。