[发明专利]一种胶冻样类芽孢杆菌以及利用其生产复合微生物菌剂的方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物制剂的制备，特别是指一种胶冻样类芽孢杆菌以及利用其生产复合微生物菌剂的方法。

背景技术

长期以来，由于大量使用化学农药而造成的环境污染问题日趋严重。化学农药因其不具有选择性，对有益的生物也会造成威胁，并且化学农药的不可降解性，极易在动植物体内积累而造成污染物的富集。随着公众对“绿色食品”、“无公害食品”的要求越来越高，市场对无污染、可降解的生物农药需求量也逐渐增多，从农药研究和生产的发展趋势来看，新型的绿色生物源农用制剂有着广阔的开发应用前景。

近年来国内外许多研究发现，寡糖类物质具有很重要生物活性，已引起了有关学者的高度重视，一致认为其具有极大的研究和应用价值，特别是聚合度20以下的氨基寡糖，由水产品加工的附产物——甲壳素而来，是绿色安全的天然生物源物质，在医药、农业、食品方面的应用都是不容忽视的，特别是作为一种安全无毒的生物源农药被证实可有效地诱导植物产生防御反应，提高植物抗逆能力，可用来防治植物病害，从而调节和促进植物生长，不破坏生态平衡，其具有重要的研究和生产价值。微生物菌剂是近年大力发展和广泛应用的新型绿色生物制剂，具有成本低、肥效高、无污染、可节约能源等优点，能提供植物所需的多种营养物质，可促进植物生长，改良土壤结构，修复生态环境恶化的土壤，达到改善作物品质、提高产量的功效，目前是化肥有效的替代品。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种胶冻样类芽孢杆菌。

本发明的目的之二是提供利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法。

本发明的整体技术构思是：

一种胶冻样类芽孢杆菌（Paenibacillus mucilaginosus），其保藏编号为CGMCC No.7240。

上述微生物已于2013年1月31日提交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC）保藏，其保藏编号为CGMCC No.7240，该保藏单位的地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

上述微生物的理化特性及培养特征是：在无氮培养基上，菌落表面湿润、光滑，边缘整齐，质地粘稠并有弹性，无色透明隆起，菌体杆状，大小为4-7×1-1.2μm，在有氮淀粉培养基上30小时开始形成芽孢，芽孢椭圆形，位于孢囊中部，孢囊不膨大，菌体幼龄时周生鞭毛，在有氮钾长石培养基上20小时后形成肥厚荚膜，革兰氏染色阴性。

在纯培养条件下，从100g钾长石粉中释放出比对照高219mg有效钾，增加67.38%；从100g土壤矿物（硅铝酸盐）中分解出比对照高47mg的水溶性钾，增加35.34%。在以100g磷矿粉为底物时，分解出比对照高80.4mg的可利用性磷；发酵液经液相色谱测定证明，该菌株可产生赤霉素、细胞分裂素和某些抗生素类的生理活性物质和营养物质，因此利用该菌株生产的生物制剂具有营养、抗病、改土、促生长的多重效果。

利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法，包括如下工艺步骤：

A、扩大培养

将原始菌种经扩大培养制成生产菌种；

原始菌种选用胶冻样类芽孢杆菌（Paenibacillus mucilaginosus），其保藏编号为CGMCC No.7240；

B、制备发酵液

B1、发酵

按照体积比为生产菌种：发酵培养基=10%-15%的比例将生产菌种接种到灭菌后的发酵培养基中发酵，发酵的条件为：温度25-32℃，压力0.03-0.7MPa，通风量控制条件是：发酵开始后为200-250M³/hr、发酵4小时后为320-360M³/hr、发酵8小时后为420-470M³/hr、发酵12小时后为520-560M³/hr、发酵20小时后为600-630M³/hr，发酵开始4-8小时后开始搅拌，直至发酵终点；

发酵培养基由如下质量百分比的组份组成：

淀粉0.3-1.5%，豆饼粉0.03-0.1%，碳酸钙0.05-0.2%，蔗糖0.08-0.5%，硫酸铵0.01-0.08%，磷酸氢二钾0.08-0.5%，硫酸镁0.08-0.5%，三氯化铁0.008-0.05%，酵母膏0.03-0.15%，氢氧化钾0.01-0.1%，消泡剂0.005-0.02%，余量为自来水，pH=7.2-7.4；

B2、检测及终点控制