[发明专利]一种胶冻样类芽孢杆菌以及利用其生产复合微生物菌剂的方法

权利要求书

1.一种胶冻样类芽孢杆菌，其特征在于其保藏编号为CGMCC No.7240。

2.利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法，其特征在于包括如下工艺步骤：

A、扩大培养

将原始菌种经扩大培养制成生产菌种；

原始菌种选用胶冻样类芽孢杆菌Paenibacillus mucilaginosus，其保藏编号为CGMCC No.7240；

B、制备发酵液

B1、发酵

按照体积比为生产菌种：发酵培养基=10%-15%的比例将生产菌种接种到灭菌后的发酵培养基中发酵，发酵的条件为：温度25-32℃，压力0.03-0.7MPa，通风量控制条件是：发酵开始后为200-250M³/hr、发酵4小时后为320-360M³/hr、发酵8小时后为420-470M³/hr、发酵12小时后为520-560M³/hr、发酵20小时后为600-630M³/hr，发酵开始4-8小时后开始搅拌，直至发酵终点；

发酵培养基由如下质量百分比的组份组成：

淀粉0.3-1.5%，豆饼粉0.03-0.1%，碳酸钙0.05-0.2%，蔗糖0.08-0.5%，硫酸铵0.01-0.08%，磷酸氢二钾0.08-0.5%，硫酸镁0.08-0.5%，三氯化铁0.008-0.05%，酵母膏0.03-0.15%，氢氧化钾0.01-0.1%，消泡剂0.005-0.02%，余量为自来水，pH=7.2-7.4；

B2、检测及终点控制

发酵中根据菌体生长状况定时取样、镜检，发酵至40±5小时后取样镜检，当95%的营养体形成芽孢，芽孢含量达到5亿个/毫升以上，终止发酵并制成发酵液；

C、复合微生物菌剂的配制

按照步骤B中制备的发酵液为69.7-91.2kg、氨基寡糖为8-30kg、复合微量元素添加剂为0.3-0.8kg的比例，将上述组分混配制成复合微生物菌剂；其中复合微量元素添加剂由如下质量的组分组成：

硼砂或硼酸10-20kg，硫酸锌或氯化锌5-15kg，钼酸铵3-12kg，硫酸锰2-8kg。

3.根据权利要求2所述的利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法，其特征在于所述的扩大培养包括：A1、斜面菌种的的制备；A2、克氏瓶斜面菌种的制备；A3、生产菌种的制备。

4.根据权利要求3所述的利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法，其特征在于所述的A1、斜面菌种的制备是：将原始菌种接入灭菌后试管斜面培养基，在25-32℃条件下恒温培养2-5天制成斜面菌种；所述的试管斜面培养基由如下组分组成：

蔗糖5-15克，磷酸氢二钾0.2-1克，硫酸镁0.1-0.5克，氯化钠0.1-0.5克，碳酸钙0.5-3克，硫酸钙0.05-0.3克，酵母膏0.1-1克，水1000毫升，琼脂15-22克，pH=7.2。

5.根据权利要求4所述的利用胶冻样类芽孢杆菌生产复合微生物菌剂的方法，其特征在于所述的A2、克氏瓶斜面菌种的制备是：将步骤A1中制备的斜面菌种接入灭菌后的克氏瓶斜面培养基；在25-32℃条件下恒温培养4-6天制成克氏瓶斜面菌种；克氏瓶斜面培养基由如下组份组成：

葡萄糖0.5-2克，蛋白胨0.5-2克，磷酸氢二钾0.5-2克，硫酸铵0.1-0.5，酵母膏0.3-1.5克，硫酸镁0.1-0.5克，水1000ml，琼脂15-22克，pH=7.2；将上述培养基按照每瓶60-80ml的量装入250ml克氏瓶中，灭菌、摆斜面制成克氏瓶斜面培养基。