[发明专利]杂交瘤细胞株AFM1B7、其单克隆抗体及黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒

权利要求书

1.杂交瘤细胞株AFM1B7，其特征在于：它保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO.C201020。

2.单克隆抗体，其特征在于：它由保藏编号为CCTCC NO.C201020的杂交瘤细胞株AFM1B7分泌产生。

3.黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒，其特征在于：它包括荧光试纸条和含有铕标记的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体冻干品的样品反应瓶，其中：所述的荧光试纸条包括纸板，纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫和样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫，硝酸纤维素膜上自上而下设置横向质控线和检测线，所述质控线包被有兔抗鼠多克隆抗体，所述检测线上包被黄曲霉毒素M1-牛血清白蛋白偶联物(AFB1-BSA)；所述的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体为权利要求1所述的保藏编号为CCTCC NO.C201020的杂交瘤细胞株AFM1B7分泌产生的单克隆抗体。

4.根据权利要求3所述的黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒，其特征在于：所述铕标记的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体是按照以下方法制备得到的：将权利要求1所述的保藏编号为CCTCC NO.C201020的杂交瘤细胞株AFM1B7分泌产生的单克隆抗体用碳酸盐缓冲溶液透析后和铕标记试剂以质量比为0.5～2:1的比例充分混匀后静置过夜，然后经Sephadex G-50层析柱分离铕标记的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体，洗脱，收集目标产物。

5.根据权利要求3所述的黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒，其特征在于：所述荧光试纸条中的吸水垫长15～20mm，宽3～4mm；检测垫长25～30mm，宽3～4mm；样品垫长12～18mm，宽3～4mm，相邻各垫的交叠长度为1～3mm；所述检测线与硝酸纤维素膜上沿的间距为15～20mm，质控线和检测线的间距为5～10mm；所述的样品反应瓶为1-5mL的卡口瓶。

6.根据权利要求3所述的黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒，其特征在于：所述荧光试纸条中检测垫上每厘米检测线所需的黄曲霉毒素B1-牛血清白蛋白偶联物的包被量为50～100ng；每厘米质控线所需的兔抗鼠多克隆抗体的包被量为30～100g；所述样品反应瓶中铕标记的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体冻干品的含量为0.05-0.25μg。

7.根据权利要求1所述的黄曲霉毒素M1流动滞后免疫时间分辨荧光速测试剂盒，其特征在于：所述的荧光试纸条是采用以下方法获得的：

（1）将吸水纸剪裁得吸水垫；

（2）检测垫的制备：

将黄曲霉毒素M-牛血清白蛋白的偶联物AFM1-BSA配制成浓度为0.1～0.4mg/mL的包被液，于距硝酸纤维素膜上沿10～15mm的位置，用线喷方式将其横向包被于硝酸纤维素膜上，得到检测线，每厘米检测线所需黄曲霉毒素M1-牛血清白蛋白的偶联物AFM1-BSA的包被量为50～100ng，然后于37～40℃条件下干燥30～60分钟；

将兔抗鼠多克隆抗体配成浓度为0.1～0.4mg/mL的包被液，于距检测线5～10mm的位置，用线喷方式将其横向包被于硝酸纤维素膜上，得质控线，每厘米质控线所需的兔抗鼠多克隆抗体的包被量为30～100ng，然后于37～40℃条件下干燥30～60分钟；

（3）样品垫的制备：

将玻璃纤维膜放入封闭液中浸湿，取出，于37～40℃条件下干燥3～6小时，得样品垫，然后置干燥器中室温保存；

(4)荧光试纸条的组装：

在纸板的一面从上到下依次粘贴吸水垫、检测垫、样品垫，相邻各垫在连接处交叠连接，交叠长度为1～3mm，即得荧光试纸条。