[发明专利]一种促肝细胞生长活性肽的制备方法

权利要求书

1.一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，其特征在于促肝细胞生长活性肽的制备方法是按以下步骤进行的： 

一、原料预处理：取新鲜的健康乳牛肝脏，剔去血管、筋膜，用纯化水冲洗掉表面血迹，沥去水分； 

二、低温水抽提：在0℃～4℃下用胶体磨将步骤一中处理后的乳牛肝脏进行匀浆，并加入等体积的4℃纯化水，在温度为0℃～4℃的条件下，采用超声波破碎机以超声频率为25000Hz超声处理15min，然后在温度为0℃～4℃的条件下放置2h，得抽提物； 

三、热处理：将步骤二得到的抽提物通过水浴以1～2℃/min的升温速度升温至80℃～82℃，并保温15min，然后冷却至20℃～30℃； 

四、离心：将步骤三热处理后的抽提物在3500r/min的条件下离心15min，收集上清液； 

五、超滤：用截留分子量为10000道尔顿的超滤器对步骤三收集的上清液进行超滤透析，收集小于10000道尔顿分子量的上清液，再用截留分子量为5000道尔顿的超滤器对收集小于10000道尔顿分子量的上清液进行超滤透析，收集小于5000道尔顿分子量的上清液，备用； 

六、减压浓缩：将步骤五收集的小于5000道尔顿分子量的上清液，导入减压浓缩罐中，在温度为55℃～60℃、压力为150Pa的条件下进行减压浓缩至三分之一体积，得到浓缩液； 

七、超滤透析：用截留分子量为1000道尔顿的超滤器对步骤六得到的浓缩液进行超滤透析，其中，透析液为纯水，透析液体积为浓缩液的两倍，收集大于1000道尔顿分子量的上清液，即得促肝细胞生长活性肽溶液； 

八、促肝细胞生长活性肽粉制备：将步骤七得到的促肝细胞生长活性肽溶液加入到真空干燥机中，在温度为55℃～60℃、压力为150Pa的条件下，干燥2～4h，即得促肝细胞生长活性肽粉，即得促肝细胞生长活性肽。 

2.根据权利要求1所述的一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，其特征在于步骤三中所述的升温至80℃，并保温15min，然后冷却至25℃。 

3.根据权利要求1所述的一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，其特征在于步骤六中所述的在温度为58℃、压力为150Pa的条件下进行减压浓缩至三分之一体积。 

4.根据权利要求1所述的一种促肝细胞生长活性肽的制备方法，其特征在于：所述的促肝细胞生长活性肽作为主药，制成注射剂型药物或口服剂型药物。