[发明专利]一种促进表皮细胞增殖的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及干细胞及基因工程技术领域，具体涉及一种促进表皮细胞增殖的方法，及其将该方法应用于制备皮肤移植物。

背景技术

细胞具有一定的寿命，细胞的分裂能力也是有一定限度的，随着细胞分裂次数的增加，细胞增殖能力逐渐减弱，最终停止增殖。这也是细胞从干细胞经过短暂扩增细胞到终末分化细胞的过程。此过程受很多因素影响，有些因素可以减缓甚至扭转这一进程，使细胞重新获得分化、增殖能力。

目前，使细胞重新获得分化和增殖能力的策略有核移植（Wilmut I,Schnieke AE,McWhir J,Kind AJ,Campbell KH..Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells.Nature.1997 Feb 27;385(6619):810-3.）、鸡尾酒基因修饰法（Takahashi K,Yamanaka S.Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors Cell.2006 Aug 25;126(4):663-76.）、细胞裂解液（Taranger CK,Noer A,AL,AM,Boquest AC,Collas P.Induction of dedifferentiation,genomewide transcriptional programming,and epigenetic reprogramming by extracts of carcinoma and embryonic stem cells.Mol Biol Cell.2005Dec;16(12):5719-35.）、端粒酶转染Comandini A,Naro C,Adamo R,Molecular mechanisms involved in HIV-1-Tat mediated inhibition of telomerase activity in human CD4(+)T lymphocytes.Mol Immunol.2012 Dec 31;54(2):181-192.）、生长因子转染（Hu ZX,Geng JM,Liang DM,Luo M,Li ML.Hepatocyte growth factor protects human embryonic stem cell derived-neural progenitors from hydrogen peroxide-induced apoptosis.Eur JPharmacol.2010Oct25;645(1-3):23-31.）等。这些方法虽然可以让成体细胞恢复增殖能力，但存在致瘤性、细胞毒性及细胞基因型发生改变等问题。

组织工程对所需种子细胞的最基本要求就是扩增快，效率高。如何在保持原有细胞特性的基础上实现种子细胞如表皮细胞的快速、高效扩增已经成为组织工程急需解决的重点问题。

近年来的研究表明慢病毒载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因修饰与治疗的效果。在美国已经开展了慢病毒介导的基因治疗的临床研究，效果非常理想，因此具有广阔的应用前景（Dong A,Rivella S,Breda L.Gene therapy for hemoglobinopathies:progress and challenge.Transl Res.2013 Jan 18.pii:S1931-5244(12)00447-1.）。