[发明专利]一种嵌合受体及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种scFv-anti-EGFR-CD28-ζ嵌合受体，其特征在于，嵌合受体氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种DNA分子，其特征在于，它编码权利要求1所述的嵌合受体。

3.根据权利要求2所述的DNA分子，其特征在于，所述及的DNA分子核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

4.一种逆转录病毒载体，其特征在于，所述的载体携有scFv-anti-EGFR-CD28-ζ嵌合受体。

5.根据权利要求4所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述的载体用以下方法制备：在单链抗体的VL的C末端克隆入c-myc尾，将抗EGFR的单链抗体用VH和VL，CD28分子的部分胞外段、跨膜区和胞内段以及CD3ζ链胞内段依次装入逆转录病毒载体pCMMP中，并与另两个辅助载体pHDM.G和pMD.MLVgag.pol共同转染293T细胞，包装获得病毒颗粒，经离心浓缩后获得高滴度的逆转录病毒载体。

6.一种制备权利要求1所述的嵌合受体的方法，其特征在于，该方法包括：

a）overlap PCR的方法获得抗EGFR的单链抗体用VH和VL；

b）PCR的方法获得CD28分子的部分胞外段、跨膜区和胞内段以及CD3ζ链胞内段；

c）将步骤a)和b)中的片段依次装入逆转录病毒载体pCMMP中，与另两个辅助载体pHDM.G和pMD.MLVgag.pol共同转染293T细胞，包装获得病毒颗粒，经离心浓缩后获得高滴度的病毒液；

d）在小鼠T淋巴细胞的表达表面嵌合受体。

7.一种如权利要求1所述的cFv-anti-EGFR-CD28-ζ嵌合受体在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的嵌合受体在制备治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于，所述及的肿瘤是实体肿瘤。

9.根据权利要求8所述的嵌合受体在制备治疗肿瘤的药物中的应用，其特征在于，所述及的实体肿瘤是结直肠癌。