[发明专利]一种用HPLC法测定卡巴他赛有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及是一种用HPLC法测定卡巴他赛有关物质的方法，尤其是卡巴他赛中间体杂质的测定方法，属于药物分析技术领域。

背景技术

卡巴他赛（cabazitaxel）是一种紫杉烷类微管抑制剂，适用于与泼尼松联用治疗既往用含多烯紫杉醇治疗方案激素难治转移性前列腺癌患者。其化学名称为7,10-双甲基化多西紫杉醇，分子式为C₄₅H₅₇NO₁₄，化学结构如下：

目前，卡巴他赛是以植物红豆杉提取物10-去乙酰基-巴卡丁III（简称10-DAB，分子式C29H36O10）作为起始原料进行制备，例如：CN1179775A（公开日1998-04-22）先保护7,13位上羟基，再对10位羟基进行甲基化，然后脱除7,13位上的三乙基甲硅基脱保护，对7位羟基甲基化后，与侧链酸进行耦合，提纯后去保护得到卡巴他赛；或者，CN102417491A（公开日2012-04-28）先与侧链酸进行偶合，再脱去7,10位上两个保护基（2,2,2-三氯乙氧基羰基），然后通过氢化钠/碘甲烷对7,10位上的羟基进行甲基化，再开环去保护获得卡巴他赛；或者，CN102675256A（公开日2012-09-19）先将7,10位羟基用2,2,2-三氯乙氧基氯甲酸酯保护后，与内酰胺侧链反应，再脱去7,10位上羟基保护基，然后7,10位双甲基化，最后在酸性条件下水解得到卡巴他赛；等等。关于卡巴他赛的制备方法，均以10-DAB作为起始原料，并需将其7、10、13位羟基部分或全部采用不同的保护基团，如乙氧基乙基（EE）、三甲基硅基、三乙基硅基（TES）、叔丁基二甲硅基（TBDS）、叔丁基二苯基硅基、三氯乙氧基羰基（Troc）进行保护，然后脱保护，所得中间体均具有10-DAB的母核结构。

其中，CN102417491A中，在卡巴他赛合成过程中生成如下4个中间体杂质。

在药物制备和贮存过程中,对合成方法可能产生的杂质（包括中间体、副产物等有机杂质）进行监测，对于终产品的质量生产过程以及药品的质量控制非常重要。

本发明首次公开了一种卡巴他赛有关物质的测定方法，采用C18色谱快速准确地测定卡巴他赛及其中间体杂质和起始原料，从而实现了卡巴他赛中间体杂质的控制，保证了卡巴他赛及其制剂的质量可控。

发明内容

本发明的目的是提供一种用HPLC法测定卡巴他赛有关物质的方法，可用于卡巴他赛合成过程和终产品及其制剂的质量控制。

本发明提供了一种用HPLC法测定卡巴他赛有关物质的方法，其选用十八烷基键合硅胶色谱柱，以水相-有机相为流动相进行梯度洗脱，检测波长为220-240nm，其中所述水相选自水，乙酸胺，或浓度为0.01mol/L～0.05mol/L的pH为6.0～7.0的磷酸盐缓冲溶液中的任意一种或其任意混合物，所述有机相选自甲醇、乙醇或乙腈。

在本发明一些实施方案中，所述磷酸盐缓冲溶液选自磷酸二氢钾缓冲溶液、磷酸二氢钠缓冲溶液、磷酸氢二钾缓冲溶液或磷酸氢二钠缓冲溶液，优选磷酸氢二钠缓冲溶液。在本发明的一些实施方案中，所述磷酸盐缓冲溶液的浓度优选0.01mol/L～0.03mol/L，更优选0.025mol/L。在本发明的一些实施方案中，所述磷酸盐缓冲溶液的pH为7.0。

在本发明的一些实施方案中，所述十八烷基键合硅胶色谱柱填料的颗粒度为3-5μm，优选5μm。

在本发明的一些实施方案中，所述检测波长为230nm。

在本发明的一些实施方案中，所述水相-有机相是水-乙腈。

在本发明的一些实施方案中，所述水-乙腈梯度洗脱的体积比为35%-45%：65%-55%（0min），15%：85%（30min），0%-10%：100%-90%（50min），15%：85%（55min）和35%-45%：65%-55%（60min），优选40%：60%（0min），15%：85%（30min），0%：100%（50min），15%：85%（55min）和40%：60%（60min）。

在本发明的一些实施方案中，所述水相-有机相是磷酸氢二钠缓冲溶液-乙腈，其中磷酸氢二钠缓冲溶液的pH为7.0、浓度为0.025mol/L。