[发明专利]一种地特胰岛素的纯化方法有效
| 申请号： | 201310107097.1 | 申请日： | 2013-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN103145829A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 李蕴波;杜家富;司建萍;褚杨杰;孙美禄 | 申请（专利权）人： | 江苏诺泰制药有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/62 | 分类号： | C07K14/62;C07K1/18 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省连云*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种地 胰岛素 纯化 方法 | ||
1.一种地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：所述的原料是由去B30的重组人胰岛素和十四烷基脂肪酸-N-琥珀酰亚胺酯一步反应制得的地特胰岛素溶液；纯化采用离子交换层析方法进行，其步骤如下：
（1）采用氯化钠浓度低于50mM、pH值为2-4的酸性缓冲液平衡阳离子交换柱4.5-5.5CV；并用前述酸性缓冲液或用同体系的稀酸将地特胰岛素溶液调节至pH值<5，得样品溶液；
（2）将样品溶液上到阳离子交换柱上，此时十四烷基脂肪酸-N-琥珀酰亚胺酯不挂柱，会流穿出来，然后用平衡缓冲液冲洗阳离子交换柱2.5-3.5CV；
（3） 采用氯化钠浓度为0.5-1.0M 、pH值为2-4的酸性缓冲液线性梯度洗脱的方式将吸附在柱子上的各种物质依次洗脱下来，收集主峰即得目的产物地特胰岛素。
2.根据权利要求1所述的地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：所述的酸性缓冲溶液的pH值为3-3.5。
3.根据权利要求1或2所述的地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：所述的酸性缓冲溶液为醋酸钠缓冲液或柠檬酸钠缓冲液。
4.根据权利要求3所述的地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：步骤（1）所述酸性缓冲溶液是氯化钠浓度为10-50mM的醋酸钠缓冲液或柠檬酸钠缓冲液。
5.根据权利要求1所述的地特胰岛素的纯化方法，其特征在于：离子交换层析使用的离子交换树脂选自SP Sepharose F.F.、SP Sepharose H.P.、S Sepharose F. F.、Capto S、Source 15S、Source 30S或Capto SP ImpRes。
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