[发明专利]甘草有效成分的同步制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物的提取分离纯化领域，具体涉及一种甘草有效成分的同步制备方法，具体涉及从甘草中同步提取分离异戊烯基黄酮、除异戊烯基黄酮外的总黄酮、总皂苷及总多糖的方法。

背景技术

传统中医理论认为甘草味甘、性平，有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功效，主治脾胃虚弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽多痰等。药理实验证实甘草具有保肝、抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节、降糖和抗血小板凝集等作用。其主要活性成分是黄酮类、皂苷类和多糖类化合物。甘草黄酮具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等作用，其中连有异戊烯基的黄酮类因其抗肿瘤作用明显而日益受到重视。甘草皂苷具有解毒、止咳平喘、抗炎、抗过敏、抗肝损伤及降低胆固醇等的活性。现代药理研究表明桑白皮的多糖类同样具有降血糖作用。目前，现有提取分离技术是单一或间歇性的，往往单纯提取甘草皂苷，甘草渣被废弃，或再从提取后的残渣中提取甘草黄酮，再提取甘草多糖。中国专利“一种提取分离甘草酸、甘草黄酮和甘草多糖的方法”（CN1803789）公开了一种从甘草中提取甘草酸、黄酮及多糖的方法，但工艺过程中运用大量有机溶剂，不够经济、环保。中国专利“从甘草中系统分离、提取甘草黄酮、甘草酸、甘草多糖生产方法”（CN1359905A）公开了一种系统提取甘草酸、甘草黄酮和甘草多糖的方法，但提取分离步骤太多不适宜工业化生产。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种同步提取、分离、制备甘草异戊烯基黄酮、除异戊烯基黄酮外的总黄酮、总皂苷和总多糖的方法。

本发明所述甘草原料来源于豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草 Glycyrrhiza inflata Bat. 或光果甘草 Glycyrrhiza glabra L. 的干燥根及根茎。作为提取甘草异戊烯基黄酮、总黄酮、总皂苷和总多糖的原料，可以是市售甘草饮片，也可以是此植物的茎、叶、花穗、果实、地下茎及根等任意部位，其中优选的药材部位为干燥根及根茎。本发明的方法：原料粉碎后，通过用乙醇提取、稀醇上样、树脂串联分离、浓乙醇洗脱，简化工艺过程，提高产品总黄酮、总皂苷及总多糖含量。本发明是降低成本的一种大孔树脂纯化甘草异戊烯基黄酮、除异戊烯基外的总黄酮、总皂苷及总多糖的方法。

本发明提供的甘草有效成分的同步制备方法，包括如下步骤：

1）乙醇提取：取甘草，以乙醇水溶液浸泡并在80~100℃下浸煮提取，得提取液；

2）树脂分离：步骤1）得到的提取液过滤后，滤液依次通过极性不同的两节串联大孔树脂柱，收集流出液，其中，所述两节串联大孔树脂柱为非极性大孔树脂柱串联中极性或极性大孔树脂柱，或者为极性大孔树脂柱串联非极性大孔树脂柱；

3）洗脱：先用水对两节串联大孔树脂柱进行冲洗除杂，然后非极性大孔树脂柱以浓度70%~90%的乙醇水溶液进行洗脱，得到甘草异戊烯基黄酮洗脱液；中极性或极性大孔树脂柱则依次以浓度30%~40%的乙醇水溶液和浓度50%~70%的乙醇水溶液进行两次洗脱，依次得到除异戊烯基黄酮外的甘草总黄酮洗脱液和甘草总皂苷洗脱液；

4）回收：分别将步骤2）的流出液、甘草异戊烯基黄酮洗脱液、除异戊烯基黄酮外的甘草总黄酮洗脱液和甘草总皂苷洗脱液浓缩、干燥，即得到甘草总多糖、甘草异戊烯基黄酮、除异戊烯基黄酮外的甘草总黄酮和甘草总皂苷。

优选地，步骤1）中甘草粉碎至10~120目后，再以乙醇水溶液浸泡并在80~100℃下浸煮提取，得提取液。

优选地，步骤1）乙醇提取：一次提取：取甘草，加入浓度60%~95%的乙醇水溶液浸泡，然后加热至80~100℃保温浸煮提取，过滤，收集一次提取液和滤渣；二次提取：滤渣以浓度20%~60% 乙醇水溶液在80~100℃下保温浸煮提取1~5次，收集提取液合并，得二次提取液；合并一次提取液和二次提取液。

进一步优选地，步骤1）乙醇提取：一次提取：取甘草，加入甘草重量1~10倍的浓度60%~95%的乙醇水溶液浸泡2~3 h，然后加热至80~100℃保温1~2 h，过滤，收集一次提取液和滤渣；二次提取：滤渣以甘草重量1~10倍的浓度20%~60% 乙醇水溶液在80~100℃下保温1~2h, 提取1~5次，收集提取液合并，得二次提取液；合并一次提取液和二次提取液。