[发明专利]能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌及其分离方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌及其分离方法。 

背景技术

白色念珠菌又称白假丝酵母菌（candida Albicans），广泛存在于自然界和人的皮肤、口腔、上呼吸道、肠道及阴道，是一种条件致病性真菌。健康状态下，人体表或体内的白色念珠菌数量较少，不引起疾病。当机体免疫力下降或微生态受到破坏等特殊情况下，白色念珠菌大量生长，引起急性、亚急性或慢性感染，是最常见的真菌病。可能诱发白色念珠菌感染的因素有：获得性免疫缺陷综合症（AIDS），基因缺陷，抗生素和免疫抑制剂的使用，肿瘤及肿瘤放化疗，器官移植等。 

皮肤念珠菌病好发于皮肤皱褶处（腑窝、腹股沟，乳房下，肛门周围及甲沟，指间），表现为皮肤潮红、潮湿、发亮，有时盖上一层白色或呈破裂状物，病变周围有小水泡。粘膜念珠菌病以鹅口疮、口角炎、阴道炎最多见，在粘膜表面盖有凝乳大小不等的白色薄膜，剥除后，留下潮红基底，并产生裂隙及浅表溃疡。念珠菌疹是念珠菌及其代谢产物引起的皮肤变态反应，主要损害为成群的无菌性水疱，多见于手指间，也可见到银屑病样、玫瑰糠疹样、脂溢性皮炎样、荨麻疹样、离心性环状红斑样损害。白色念珠菌经血液入侵并扩散到全身时，可导致严重的感染，常见的有肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等，偶尔也可发生败血症，在院内感染中十分常见，且不易诊断治疗，致死率极高。近年来随着大剂量抗生素、激素、免疫抑制剂的应用，以及器官移植术的开展，白色念珠感染发病率渐趋增高，常可危及生命造成严重后果。 

抗真菌药物是目前治疗白色念珠菌感染最常用的手段。同时，使患者远离可能含有白色念珠菌的食品，并禁食有利于酵母菌生长的食物，也是需要采取的措施之一。如有可能，抗生素或免疫抑制剂应该被停用，或者减少到不得不使用的最低剂量。然而，很多请况下，即使三种治疗手段同时应用，也不能使病人完全摆脱白色念珠菌的困扰。一旦停用抗真菌药物，白色念珠菌感染就会复发。因此，造成相关感染的根本原因并不在白色念珠菌本身，提高人体免疫力并恢复微生态平衡才是解决问题的根本途径。 

  益生菌尤其是乳酸杆菌在维护微生态平衡、防治感染中具有重要作用。乳酸杆菌在生长过程中，需要大量的营养物质，从而减少了可供有害微生物生长的营养成分；能够分泌过氧化氢、硫化氢和抗菌肽等物质，直接抑制或杀灭有害菌生长；通过分泌乳酸等有机酸降低环境pH值，减少白色念珠菌等滋生；与表皮细胞的黏膜黏附占位，避免条件致病菌对机体接触与侵袭；调节增强免疫能力，主动杀灭有害菌；促进表皮细胞增生等重要功能。不同乳酸杆菌的抗菌能力和抗菌谱差别很大，筛选具有抗白色念珠菌功能的乳酸杆菌，对于防治感染，保护和促进人类健康都具有重要意义。 

  发明内容

本发明的目的是提供一种能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌及其分离方法。 

能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius Li01，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.7045，保藏时间2012年12月26日，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮政编码100101。 

所述的能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌形态学特征为：菌体为杆状，不产孢子，无运动性。革兰氏染色呈阳性，在营养琼脂培养基上形成白色群落。理化的特征如下：能发酵葡萄糖，果糖，蜜二糖，海藻糖，乳糖，甘露糖醇，甘露糖，棉子糖，蔗糖，半乳糖，鼠李糖，麦芽糖和山梨糖醇产酸，不能利用阿拉伯糖，木糖，纤维二糖，松三糖，甲基AD-葡萄糖苷，甲基AD-甘露糖苷，水杨苷，甘油或山梨糖发酵产酸。 

能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌的16S核糖体DNA(16S rDNA)全序列为SEQ ID NO：1所示。 

  能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌的全细胞水解脂肪酸含量为： 

一种能够抑制白色念珠菌生长的唾液乳酸杆菌的分离方法包括如下步骤： 

1）分别取少量来自不同健康人不同部位含微生物样本，加入到0.5～10毫升富集培养基中，20～37⁰C、厌氧条件下，富集培养24～72小时；

2）将上述样本富集培养基，稀释后100～10000倍后，取50～300微升涂布到筛选平板上，20～37⁰C厌氧培养24～72小时；