[发明专利]基于高效液相色谱的地沟油聚类分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于高效液相色谱的地沟油聚类分析方法。根据目标油样的主要成分为甘油三脂和其他杂质两大类，通过对其高效液相色谱特征峰的指纹图谱结合聚类分析和判别分析联合使用，实现对地沟油的分析检测以及分离纯化。本方法属于食品分析领域。 

背景技术

地沟油泛指生活中存在的各种劣质食用油，一般包括潲水油、煎炸废油、食品及相关企业产生的废弃油脂等。地沟油是质量极差，极不卫生，过氧化值、酸价、水分严重超标的非食用油，可引起消化不良，腹痛等疾病，长期食用甚至可成为癌变诱因。由于存在不小的经济诱惑，不少不法商贩铤而走险，将地沟油经过碱炼、水洗、脱色、脱臭四大制作流程，然后作为食用油销售，给社会带来了极大的危害。目前仍然欠缺对地沟油检测充当把关作用的检测方法，这使得地沟油可以在市场上畅行无阻。 

根据相关文献报道，地沟油检测方法有很多，如酸值、电导率检测等理化检测技术，气相色谱，离子色谱，原子吸收光谱、拉曼光谱检测法，核磁，质谱等，但是现有的这些方法存在特征指标专一性不强，准确性不高，检测灵敏度低等不足，仅适用于特定类型的餐厨废油脂的检测，无法准确鉴别地沟油。为此，国家卫生部曾数次在全国范围内征集地沟油的检测方法。 

在相关文献中，目前的检测方法主要是这对地沟油中的某些杂质成分进行检测的，郭涛等利用高效液相色谱测定地沟油中胆固醇、生物胺、多环芳烃的含量来实现对地沟油的检测。Van Ruth等利用气相色谱检测油脂中甘油三酯、脂肪酸、可挥发性成分的含量和种类对油脂进行区分。Abbas O等使用拉曼光谱来鉴别动物性油脂。Weiguo Liu等通过使用稳定碳同位素和分析脂肪酸丰度来鉴别地沟油。这些方法仅仅针对地沟油中某一项杂质成分进行检测，具有一定的借鉴意义，但不能作为地沟油检测的关键指标。 

近几十年来色谱技术，特别是高效液相色谱技术，样品处理简单，效率高，灵敏度，速度快，分离效果好，分离范围广、重复性好等优点，在物理、化学、生物具有广泛的应用。 

利用高效液相色谱技术和多因素变量分析的优点，本发明将高效液相色谱指纹图谱聚类分析和判别分析建立了一种新的检测地沟油的方法并可用于分离纯化。 

发明内容

本发明要解决的技术问题在于提供一种地沟油的分析检测方法，利用这种方法可以有效地区分地沟油和正常食用油，为当前食品市场油品质量检测监控提供一种有益的参考方法。 

为实现上述目的，本发明所提出的地沟油检测方法，采用高效液相色谱仪对样品进行测定，开发出14个用于鉴别地沟油高效液相色谱峰的指纹图谱，得到其面积百分比，建立起油品高效液相特征色谱峰指纹图谱数据库，采用聚类分析技术对库中样品进行分类，建立判别函数，构建样品数据库，采用判别分析处理未知样品的数据，来鉴别未知油为地沟油还是合格食用油。其特征在于： 

1.这种方法涉及高效液相色谱峰指纹图谱结合聚类分析和判别分析的联合使用，这些高效液相指纹图谱包括甘油三酯色谱峰和杂质峰。 

2.开发了14个甘油三酯(高效液相色谱)指纹图谱，可用于有效区分地沟油和正常食用油。 

3.利用这14个甘油三酯(高效液相色谱)指纹图谱，建立起地沟油和正常食用油的¹H-NMR数据库，并可通过增加该数据库的容量来提高本方法的准确性和灵敏度。 

4.聚类分析采用离差平方和法(Ward’s method)进行聚类。 

5.判别分析通过2种判别函数进行判别，最终判别结果距离这些聚类中心最近的。 

本发明的有益效果是： 

1)高效液相色谱技术发展成熟，样品前处理操作简单，分离范围广，操作快速，重复性好，经简单处理即可进行测量，几十分钟即可获得一个样品的高效液相色谱图谱，结合事先做好的数据库可以在短时间内实现样品检测。 

2)采用多变量分析技术，结论可信度高，可以有效避免人为误差，准确性和灵敏度可以通过增加样品容量得到提高。 

3)混合物经色谱分离后，将各组分直接由接口导入其它仪器中进行分离纯化，实现杂质成分的鉴定。 

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。 

图1为八种油样品HPLC出峰时间与峰面积百分比图。1为福临门花生调和油，2为花生花醇香花生油，3为科瑞欧特级初榨橄榄油，4为玉米胚芽油，5为贵州纯地沟油，6为广州东莞82号市售精炼地沟油，7为广州东莞83号市售精炼地沟油，8为重庆裕丰地沟油。