[发明专利]采用SPE-HPLC/UV检测烟叶和果蔬中甲噻诱胺残留的方法

说明书

技术领域

本发明属于痕量分析技术领域，具体涉及一种采用SPE-HPLC/UV检测烟叶和果蔬中甲噻诱胺残留的方法。

背景技术

甲噻诱胺由南开大学研发，为杂环类杀菌剂，持效期较长，是植物诱导抗病激活剂。主要用于防治子囊菌、担子菌等病原菌引起的多种病害，对白粉病、锈病、黑星病、灰斑病、褐斑病具有很好的防效，是一种前景较好的杀菌剂。但是作为一种新药，在农业上其使用还存在较大的盲目性。由于国内外对甲噻诱胺的相关研究较少，所以需对甲噻诱胺的检测方法及残留行为等方面开展深入和广泛的研究，为规范用药，保障农业生产和人民健康给予技术上的支持。

目前对甲噻诱胺的残留分析国内外尚未见相关报道，在国内外还处于空白阶段。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作较简单、对目标物干扰少，准确检测烟叶和果蔬中甲噻诱胺残留的检测方法。该方法具有简便迅速、准确可靠的特点，对指导甲噻诱胺的安全合理使用，控制烟叶和果蔬中甲噻诱胺残留具有重要价值。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种采用SPE-HPLC/UV检测烟叶和果蔬中甲噻诱胺残留的方法，包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制：称取甲噻诱胺标准品，用有机溶剂溶解定容，制成标准储备液，将甲噻诱胺标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液；

(2)提取：称取烟叶或果蔬试样于锥形瓶中，加入甲醇溶液，震荡过滤；滤液加入NaCl溶液和石油醚混合溶液进行液液分配，重复萃取一次，合并上层有机相，水浴减压浓缩近干；

(3)净化：浓缩瓶中残留物以丙酮-正己烷混合溶液溶解洗涤，转入到预先以正己烷、丙酮-正己烷活化的Florisil柱中，以丙酮-正己烷混合溶液洗脱，收集；合并流出液，水浴减压浓缩近干，以甲醇溶液溶解并定容；

(4)仪器检测：待仪器状态稳定后，用第(1)步中的系列标准工作液进样，液相色谱检测，在此基础上，对第(3)步收集的净化样品进行液相色谱检测；

(5)标准曲线的建立：采用峰面积定量，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；

(6)结果分析：按以下公式计算试样中甲噻诱胺的含量

R=C1×V1×S2×V2V3×S1×W]]>

R—样品中甲噻诱胺残留量，单位mg/kg；

C₁—标准溶液浓度，单位mg/L；

V₁—标准溶液进样体积，单位μL；

V₂—样品溶液最终定容体积，单位mL；

V₃—样品溶液进样体积，单位μL；

S₁—标准溶液的峰高，AU；

S₂—样品溶液的峰高，AU；

W—样品称取质量，单位g；

进一步地，所述步骤(1)中称取甲噻诱胺标准品的重量为0.01g±0.2mg；有机溶剂采用色谱甲醇。

进一步地，所述步骤(1)中标准储备液是指制成100mg/L储备液。

进一步地，所述步骤(2)中甲醇使用量为6-15mL/g试样；NaCl质量浓度为10%，使用量为0.15mL/mL浓缩液。

进一步地，所述步骤(3)丙酮-正己烷混合溶液中丙酮和正己烷的体积比为2:8。

进一步地，所述步骤(4)中液相色谱选用Waters Alliance e2695高效液相色谱，配2487紫外检测器；色谱柱选用Waters Sun Fine，5.0μm，4.6×250mm；检测条件：

测定波长：230nm；

进样量：10μL；