[发明专利]采用SPE-GC/ECD测定烟草中腈菌唑残留量的方法

说明书

技术领域

本发明属于痕量分析技术领域，具体涉及一种采用SPE-GC/ECD测定烟草中腈菌唑残留量的方法。

背景技术

腈菌唑为三唑类杀菌剂，能够抑制病原菌表角甾醇的生物合成，具有强内吸性，药效高、对作物安全、持效期长。主要用于防治子囊菌、担子菌等病原菌引起的多种病害，对白粉病、锈病、黑星病、灰斑病、褐斑病具有很好的防效，是一种前景较好的杀菌剂。近年来随着腈菌唑在国内外的大量应用，其在环境和农产品上的残留问题日益突出，受到人们的高度关注。

目前对腈菌唑在小麦、黄瓜和辣椒等作物和蔬菜上的残留分析已有相关报道，一般是采用丙酮、甲醇提取蔬菜水果中的腈菌唑农药残留，经二氯甲烷萃取与层析柱净化，用气相色谱法氮磷检测器(NPD)或电子捕获检测器(ECD)进行检测。检测实践发现，这种残留分析方法虽然提取效率较高，但存在以下不足：1）由于采用丙酮、甲醇作为提取剂，糖类、脂肪、蛋白质等杂质也容易被提取出来，对腈菌唑的检测存在较大的干扰，虽然用二氯甲烷多次萃取，但增加了操作步骤，不仅增加了工作量，而且容易造成误差。2）提取剂和水相难分离，使得提取和净化过程相对繁琐。3）采用柱层析的方法不仅操作复杂，而且重现性差，并不适应于烟草类含大量色素、油脂、杂质的样品，净化不当，杂质峰极易干扰检测结果。

但是目前的检测方法如果用来检测烟叶中腈菌唑残留量存在的缺陷是：干扰较多，尤其是烟碱和蛋白质类等杂质容易对腈菌唑残留量的检测形成干扰。烟叶中烟碱含量较多，烟碱含量可达1-3%，烟叶中蛋白质含量也非常高，一般可达15%，最多可达到17%。上述方法虽然操作简便，但是并不能有效去除烟叶中的烟碱和蛋白质等杂质。在检测时，烟碱和蛋白质的存在容易形成干扰峰，影响对目标物的检测准确性。

发明内容

本发明的目的在于弥补现有腈菌唑检测技术的不足，提供一种操作较简单、对目标物干扰少，采用SPE-GC/ECD准确检测烟草中腈菌唑残留的检测方法。该方法具有简便迅速、准确可靠的特点，对指导腈菌唑在烟草上的安全合理使用，控制烟草中腈菌唑残留具有重要价值。

本发明是通过以下技术方案实现的，

一种采用SPE-GC/ECD测定烟草中腈菌唑残留量的方法，包括以下步骤：

(1)标准溶液的配制：称取腈菌唑标准品，用有机溶剂溶解定容，制成标准储备液，将腈菌唑标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液；

(2)提取：准确称取鲜烟叶样品置于锥形瓶中，然后加入适量酸性乙腈溶液，震荡提取后加氯化钠静置分层，再用无水硫酸钠除水，浓缩近干；

(3)净化：对步骤（2）所得的浓缩残留物进行净化分离，先将浓缩残留物用丙酮-正己烷混合溶液溶解，然后转入丙酮-正己烷混合溶液预淋洗的弗罗里硅土固相小柱中，利用丙酮-正己烷混合溶液溶剂进行淋洗，收集淋洗液，浓缩，定容；

(4)仪器检测：待仪器状态稳定后，用第(1)步中的系列标准工作液进样，气相色谱检测，在此基础上，对第(3)步收集的净化样品进行气相色谱检测；

(5)标准曲线的建立：以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，

绘制标准曲线；

(6)结果分析：按以下公式计算试样中腈菌唑的含量

R=C1×V1×S2×V2V3×S1×W]]>

R—样品中腈菌唑残留量，单位mg/kg；

C₁—标准溶液浓度，单位mg/L；

V₁—标准溶液进样体积，单位μL；

V₂—样品溶液最终定容体积，单位mL；

V₃—样品溶液进样体积，单位μL；