[发明专利]一种西洋参不定根组织培养方法无效
申请号: | 201310086310.5 | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN103141391A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 高文远;刘辉;郭松波;满淑丽;王娟 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 陆艺 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 西洋参 不定根 组织培养 方法 | ||
1.一种西洋参不定根组织培养方法,其特征是包括如下步骤:
(1)西洋参愈伤组织的诱导:
取灭菌后的西洋参新鲜根除去根皮的组织,切成0.5~1cm2的小块接种到第一种固体培养基上,在无菌、23~25℃及避光条件下培养3~4周,形成愈伤组织;
(2)西洋参愈伤组织的继代培养:
将愈伤组织接种到第二种固体培养基上,在无菌、23~25℃及避光条件下培养3~4周;
(3)西洋参不定根的诱导:
将步骤(2)获得的继代培养出的愈伤组织接种到第三种固体培养基上,在无菌、23~25℃及避光条件下培养3~5周,培养出西洋参不定根;
(4)西洋参不定根的继代培养:
挑选出生长良好的步骤(3)获得的西洋参不定根接种到液体培养基内,在摇床上,在无菌、23-25℃及避光条件下培养4~5周,获得西洋参不定根;
(5)西洋参不定根的反应器培养:
将步骤(4)获得的西洋参不定根接种到含有2L液体培养基的3L球形鼓泡式反应器中,在无菌、20-25℃及避光条件下培养4~5周,收获,干燥;
所述第一种固体培养基为:含有1.0-2.0mg/L(2,4-二氯苯氧基)乙酸、0.1-0.5mg/L激动素、30-40g/L蔗糖的pH=5.8-6.0的MS固体培养基;
所述第二种固体培养基为:含有1.0-2.0mg/L(2,4-二氯苯氧基)乙酸、0.1-0.5mg/L6-苄基腺嘌呤、30-40g/L蔗糖的pH=5.8-6.0的MS固体培养基;
所述第三种固体培养基为:含有1.0-5.0mg/L吲哚丁酸、30-40g/L蔗糖的pH=5.8-6.0的MS固体培养基;
所述液体培养基为含有3.0-5.0mg/L吲哚丁酸、0.5-1.0mg/L萘乙酸、30-40g/L蔗糖的pH=5.8-6.0的MS液体培养基。
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