[发明专利]一种合成阿拉泊韦的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽的化学合成方法，尤其涉及合成阿拉泊韦的方法。

背景技术

目前，感染丙型肝炎(HCV)的人全世界约有1.7亿。最初的感染过程通常是缓和的，然而免疫系统常常无法清除病毒，持续感染的人群处于肝硬化和肝细胞癌的高风险中(参见Poynard等，Lancet349，(1997)，825-832)。尚没有有效的的疫苗预防HCV(参见Manns等，India J.Gastroenterol.20(Suppl.1),(2001),C47-51;Tan等,Nat.Rev.Drug Discov.1,(2002),867-881)。

最近，通过临床观察资料描述了一种新的使用环孢菌素治疗HCV感染的方法(参见Teraoka等，Transplant Proc,1988,20(3suppl.3),868-876;Inoue等，J.Gastroenterol,2003,38,567-572)。研究显示环孢菌素A(CsA)以临床上能达到的药物浓度抑制HCV亚基因组复制子在体外细胞内的复制(参见Watashi等，Hepatology38,2003,1282-1288;Nakagawa等，BBRC313,2004,42-47)。Ko等的专利申请EP04840281中报道了NIM811和其他9种环孢菌素A衍生物的非免疫抑制性，认为在HIV感染治疗和AIDS预防中可能有用。那些衍生物的设计包括环孢菌素A的4-和/5-位氨基酸上的修饰。

通过修饰环孢菌素A的2-和/或6-位氨基酸，Sigal等合成了总计61种的环孢菌素类似物，并观察到这样的化学修饰诱导了免疫抑制活性的减少(参见Sigal等，J.Exp.Med.,173,1991,619-628)。Barriere等描述了修饰环孢菌素A的3-位氨基酸的进一步尝试(参见WO98/28328、WO98/28329和WO98/28330)。

Debio公司开发的DEB025(阿拉泊韦，Alisporivir)就是这些修饰的环孢菌素类似物中，生物活性比较好的一个。DEB025除了其非免疫抑制性之外，其对亲环蛋白具有显著增加的亲和力，所增加的亲和力与提高的抑制HCV复制的功效相关(参见WO2006038088)。Wenger等在WO00/01715中已报道了DEB025的结构，其CAS登记号为254435-95-5。DEB025是一种下列分子式所描述的环状十一氨基酸多肽：

-MeBmt-αAbu-D-MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-(D)Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-

1    2    3    4    5    6    7    8    9    10    11

其中MeBmt是N-甲基-(4R)-4-丁-2E-烯-1-基-4-甲基-(L)苏氨酸，αAbu是L-α-氨基丁酸，D-MeAla是N-甲基-D丙氨酸，EtVal是N-乙基-L-缬氨酸，Val是L-缬氨酸，MeLeu是N-甲基-L-亮氨酸，Ala是L-丙氨酸，(D)Ala是D-丙氨酸，以及MeVal是N-甲基-L-缬氨酸，也有称之为[D-MeAla]³-[EtVal]⁴-CsA。

现有技术WO2006038088公开了一种由H-D-MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-D-Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt-Abu-OH制备DEB025的方法，其包括在惰性气氛下，将溶于50ml二氯甲烷的H-D-MeAla-EtVal-Val-MeLeu-Ala-D-Ala-MeLeu-MeLeu-MeVal-MeBmt-Abu-OH(0.162mmol；200mg)和均三甲基吡啶(1.78mmol；0.24ml)的溶液逐滴添加到溶于3.2升二氯甲烷的(7-氮杂苯并三唑-1-基羟基)三吡咯烷鏻六氟代磷酸酯(0.486mmol；254mg)溶液中。72小时后，通过添加10％Na₂CO₃溶液水解反应混合物。蒸发二氯甲烷，并用乙酸乙酯吸收残留物。有机相依次用0.1N HCl溶液和NaCl饱和溶液洗涤，在无水Na₂SO₄上干燥并浓缩。在硅胶上纯化粗制品，获得110mg(59%)DEB025。

为解决现有技术制备方法存在收率低的难题，还需对阿拉泊韦的合成工艺进行进一步的研究。

发明内容