[发明专利]酪氨酸蛋白激酶JAK2基因中与猪抗蓝耳病相关的SNP标记及其应用

权利要求书

1.一种与猪抗蓝耳病相关的SNP标记，其特征在于，其位于猪的酪氨酸蛋白激酶JAK2基因上，所述SNP标记的核苷酸序列如SEQID NO.1所示，其中，该序列的81bp、115bp、151bp和264bp四处碱基分别为T、A、G和A的待测猪为易感蓝耳病猪品种，而这四处碱基分别为C、G、A和T的待测猪为抗蓝耳病猪品种。

2.用于检测权利要求1所述与猪抗蓝耳病相关的SNP标记的引物对，其特征在于，包括上游引物F：5’-AAGCATGATGAGCCAGCTTT-3’和下游引物R：5'-CCACTTCCCCAGTGTTGTCT-3'。

3.权利要求1所述与猪抗蓝耳病相关的SNP标记在鉴定抗蓝耳病猪品种中的应用，其包括步骤：

1）提取待测猪样品组织中的总RNA，反转录成cDNA；

2）以步骤1）中的cDNA为模板，F和R为引物，进行RT-PCR反应；

3）分析PCR产物，如果扩增产物序列中81bp、115bp、151bp和264bp四处的碱基分别为C、G、A和T，则待测猪为抗蓝耳病猪品种。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2）中反转录PCR包括的步骤为：

i）打开RNA二级结构

在一支无核酸酶污染的离心管中加入：

ii）反转录PCR

向上述离心管中加入：

反转录PCR的反应条件为：42℃，60min。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2）中常规PCR使用的扩增体系以15μl计为：

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2）中常规PCR的反应条件为：95℃ 5min；以95℃ 30s，50℃-70℃，30s-2min；72℃ 30s-2min做35个循环；72℃ 10min，于4℃保温。

7.含有权利要求2所述引物对的用于检测抗蓝耳病猪品种的试剂盒。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液中的一种或多种。

9.根据权利要求7或8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。

10.权利要求1所述与猪抗蓝耳病相关的SNP标记在猪的分子标记辅助育种中的应用。