[发明专利]一种可实时监测的固相指数富集的配体系统进化技术

权利要求书

1.一种可实时监测的固相SELEX方法，其特征在于：通过将筛选靶标固定于固相载体聚苯乙烯微量反应板中，将下游端标记过生物素的单链核苷酸库与之相结合，经过温育反应冲洗之后，加入链霉素亲和素-荧光物质鉴定本轮筛选的效果，用特定的洗脱液将已结合的ssDNA洗脱并扩增，用于下一轮筛选，直到最终筛选出能特异结合靶标的核酸适配体。

2.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：生物素标记的单链核苷酸库。

3.根据权利要求1所述的筛选方法，其特征在于：所述荧光素为异硫氰酸荧光素、四氯荧光素、六氯荧光素、羧基-4’，5’-二氯-2’，7’-二甲基荧光素、CY3、CY5、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明。

4.根据权利要求1-3任一项所述的筛选方法，其特征在于：荧光强度的大小与链霉素亲和素-荧光物质与生物素标记的单链核苷酸和靶标相结合的多少成正相关关系。

5.筛选靶标包括酶、生长因子、抗体、基因调节因子、细胞粘附因子、植物凝集素、完整的病毒颗粒、病原菌等；也包括有机染料、金属离子、药物、氨基酸等小分子物质的检测。

6.根据权利要求5所述的筛选方法中小分子物质的检测，其特征包括小分子与相应载体的偶联，其中载体蛋白主要包括牛血清白蛋白、卵清蛋白、钥孔血蓝蛋白、人血清白蛋白及人工合成的多聚赖氨酸。

7.权利要求5所述的筛选方法在筛选各种靶标中的应用。