[发明专利]一种蛋白质或多肽的纯化方法

权利要求书

1.一种蛋白质或多肽的纯化方法，所述方法是通过离子交换层析柱，从包含目标蛋白质或多肽以及杂质的混合物中，分离得到所述的目标蛋白质或多肽的，该方法包括：

1）提供离子交换填料以及所述混合物；

2）调节所述离子交换填料和/或所述混合物的pH和电导率，以使得所述混合物中的所述目标蛋白质或多肽能够被所述离子交换填料吸附；

3）将步骤2）得到的混合物与步骤2）得到的离子交换填料相接触，从而使该离子交换填料吸附所述目标蛋白质或多肽；

4）采用含有或/和不含有有机溶剂的第一缓冲液作为洗涤液，洗涤一次或多次，并且每次所用的所述洗涤液相同或不同，从而使所述的杂质从步骤3）得到的离子交换填料上洗涤下来； 

5）采用含有有机溶剂的第二缓冲液作为洗脱液，使所述目标蛋白质或多肽从步骤4）得到的离子交换填料上洗脱下来，从而得到分离的所述目标蛋白质或多肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤4）中采用洗涤液洗涤多次，并且每次所用的所述洗涤液不同，其中包括：所述第一缓冲液的种类或/和浓度相同或不同，并且/或者所述有机溶剂的种类或/和浓度相同或不同。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述第一缓冲液中含有有机溶剂，该含有有机溶剂的第一缓冲液能使所述的目标蛋白质或多肽与离子交换填料之间形成疏水相互作用，以及使所述的杂质从步骤3）得到的离子交换填料上洗涤下来。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述第一缓冲液含有与第二缓冲液中相同的有机溶剂。

5.根据权利要求1、2、3或4所述的方法，其特征在于：所述的有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、醋酸甲酯、醋酸乙酯、丙酮以及乙腈中的一种或几种。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述的洗涤液中，所述的有机溶剂的浓度为10-50%（V/V）。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：第一缓冲液的电导和/或有机溶剂浓度低于第二缓冲液的电导和/或有机溶剂浓度。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：当所述混合物中的所述目标蛋白质或多肽带正电荷时，所述的离子交换填料为阳离子交换树脂；并且在步骤2）中调节所述离子交换填料的pH，使得该pH低于所述目标蛋白质或多肽的等电点。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：当所述混合物中的所述目标蛋白质或多肽带负电荷时，所述的离子交换填料为阴离子交换树脂；并且在步骤2）中调节所述离子交换填料的pH，使得该pH高于所述目标蛋白质或多肽的等电点。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于：所述目标蛋白质或多肽为胰岛素、胰岛素类似物、生长激素或干扰素。