[发明专利]一种调控干细胞体外三维定向分化的方法

权利要求书

1.一种调控干细胞体外三维定向分化的方法，其特征在于：将干细胞包埋在含有硫酸软骨素的海藻酸钙微胶珠中，添加诱导分化培养液，通过改变制备微胶珠时海藻酸钠和硫酸软骨素的质量比调控干细胞体外定向分化，并且在分化结束后，可利用柠檬酸钠溶液溶解海藻酸钙微胶珠，进而得到纯净的分化细胞。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述干细胞包括胚胎干细胞、iPS细胞、间充质干细胞、神经干细胞、虹膜色素上皮细胞、羊膜上皮细胞、或造血干细胞。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述含有硫酸软骨素的海藻酸钙微胶珠为由含海藻酸钠和硫酸软骨素的溶液经过钙液钙化所制备，此溶液溶剂为生理盐水；采用海藻酸钠浓度为0.3-4%(W/V)，采用硫酸软骨素溶液浓度为0.5-10%(W/V)，海藻酸钠和硫酸软骨素的质量比为1-20；

含有硫酸软骨素的海藻酸钙微胶珠直径为200-2000μm；

海藻酸钠的分子量为100-1000kDa，古罗糖醛酸和甘露糖醛酸比例（GM比）范围为0.2-3，且海藻酸钠为未修饰海藻酸钠、精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸（RGD）修饰海藻酸钠、异亮氨酸-赖氨酸-缬氨酸-丙氨酸-缬氨酸（IKVAV）修饰海藻酸钠、酪氨酸-异亮氨酸-甘氨酸-丝氨酸-精氨酸（YIGSR）修饰海藻酸钠中一种或二种以上的海藻酸钠；

硫酸软骨素平均分子量为2-40kDa。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述定向分化包括干细胞向神经、心肌、肝、胰岛、成骨、软骨或脂肪细胞定向分化。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述定向分化所使用的培养容器为静态培养体系或生物反应器；

静态培养体系指使用培养瓶、培养板、培养皿、或培养袋培养；

生物反应器包括旋转式反应器、灌注式反应器、搅拌式反应器、或气升式反应器。