[发明专利]一种菌根真菌菌剂的规模化扩繁技术

说明书

技术领域

本发明属于生物肥料生产技术领域，特别涉及一种菌根真菌菌剂的规模化扩繁技术。

背景技术

（一）在能源危机、资源紧缺、环境污染等压力下，菌根真菌产品的商业化备受关注

生物肥料对提高农作物品质、保护生态环境和农业的可持续发展具有不可替代的作用。尤其是在人类面临能源危机、资源紧缺、环境污染等压力下，生物肥料的研究和应用比以往任何时期都更加受到世界各国的重视。

丛枝菌根真菌(Abuscularmycorrhizalfungi，简称AMF)在提高植物的抗逆性和抗病性、维护植物健康方面发挥着关键作用。丛枝菌根真菌是广泛分布于各种类型土壤中的一类特殊微生物，它可以和地球上约90%的维管植物的根系形成“菌根”(Arbuscularmycorrhiza，简称AM)。菌根是土壤居群一种活跃的、有生命力的互惠共生体，它同时具有植物根系和微生物的特性。国内外关于AMF在促进宿主植物生长发育、增加宿主植物P营养、调节水分代谢和增强植物抗逆性等方面的作用已有大量报道。一些研究表明，VA菌根最显著作用是在低磷土壤中，提高植物吸磷能力。植物接种菌根后，间接地扩大了作物与土壤的接触面积，磷较快地输送到菌根的菌丝，缩短了磷离子扩散到植物根表的距离，从而增加了作物对土壤磷养分的吸收。目前已在洋葱、韭菜、番茄、茄子、辣椒、黄瓜、莴苣、石刁柏、菜豆等蔬菜作物上证实了这一点。因此，丛枝菌根不仅可促进植物对营养元素的吸收，还能提高植物的抗病、抗逆能力，有利于植物的生长，对农林业生产具有重要的意义。

（二）菌根真菌扩繁技术的突破将为其商业化应用提供保障

目前，有关菌根菌的应用还有些技术问题没有解决，特别是菌根真菌还不能在人工条件下离体培养，不能快速生产出大量廉价的菌根菌种。AMF的纯培养是AMF研究及商业化的瓶颈，因此AMF的纯培养一直是人们探索的关键技术，人们从未停止过这方面的研究，目前其仍是世界各国研究的热点和重点。直到目前为止，来自盆钵培养法的根段和孢子仍然是最广泛和最可靠的菌剂。盆钵培养法是AMF菌剂扩繁的主要方式，优点在于操作简易、方法可靠，缺点是开放管理易污染，培养周期较长，繁殖体产量少、占用空间大，不便于运输携带。传统的AMF菌剂生产采用菌剂:砂:土壤=1:1:1比例种植宿主植物进行扩繁，初始菌剂用量较大，菌剂生产效率低，很难满足市场的需求。

鉴于AMF在农业应用的诸多优点和强大的市场需求，急需一种高效且易于规模化的AMF扩繁方法来扩大AMF在农业生产中的应用，为农业可持续发展提供新的途径。

发明内容

本发明针对以上技术问题，设计提供了一种特别适用于高效且易于规模化扩繁菌根真菌菌剂的方法。该方法操作简单方便，成本低，培养周期较短，繁殖体不易污染，繁殖体产量和质量高。该方法所采用装置灵活性高，易于实时调整，占用空间小，便于AMF的检测和规模化生产。

本发明所述的菌根真菌菌剂的规模化扩繁技术的具体操作步骤如下：

（1）将灭菌土壤装入栽培槽至1/2-4/5高度处，接着装入菌剂混合物至3/4-5/6高度处，浇透水后播种宿主植物种子，然后再覆一层灭菌土壤，并且在栽培槽上方盖一层薄膜保湿；最后将栽培槽置于经酒精消毒后的玻璃温室或塑料大棚内；

（2）培养期间温度控制在15-35℃，按时浇水，并且每10-15天浇灌一次营养液，出苗后揭去栽培槽上方覆盖的薄膜；

（3）宿主植物播种90-120天后，检测孢子密度，当孢子密度≥50个/cm³，即可收获；

（4）收获后，去除植株的地上部分；将根系与砂壤土分离，根系晾干，粉碎成粉末；栽培槽中剩余的砂壤土晾干，最后将根系粉末和晾干的砂壤土混合均匀，即获得丛枝菌根真菌菌剂，然后装入自封袋中，置于阴凉干燥处保存。

所述栽培槽的规格为：(40-70)cm×(15-30)cm×(15-20)cm，采用不透光的材料，使用前用75%的酒精擦拭灭菌。

步骤(1)所述的灭菌土壤为去除杂物和大块颗粒的砂壤土，并且采用间歇灭菌，即150-180℃烘2-5h，放凉后继续150-180℃烘2-5h放凉备用。

步骤(1)所述的菌剂混合物为灭菌土壤和丛枝菌根真菌菌剂的混合物，灭菌土壤和丛枝菌根真菌菌剂的质量比为3-20，优选3-8；所述的丛枝菌根真菌菌剂的孢子数≥30个/cm³。