[发明专利]一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1在功能性酸奶中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种产胆盐水解酶(Bile Salt Hydrolase，BSH)干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KL1干粉发酵剂和普通酸奶干粉发酵剂混合发酵功能性酸奶生产技术，适用于发酵乳制品中降胆固醇的功能性酸奶和微生态制剂的生产。

背景技术

益生菌(Probiotics)是指一类通过肠道定殖作用改善宿主特定部位微生态平衡并兼有若干其他有益生理功能的微生物。它们通过改善肠道微生物生态平衡，控制肠道感染，降低血清胆固醇水平，提高乳糖不耐症人对乳糖的利用，并能刺激特异性或非特异性免疫反应，具有免疫增强的作用。益生菌制品的活菌应该代谢稳定，活性较强，通过消化道后大量存活，进入肠道后发挥益生菌作用。目前用于生产益生菌剂的优良菌种有双歧杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属中的乳酸乳球菌乳酸亚种等。

本发明所用干酪乳杆菌KL1菌株是从藏灵菇中分离纯化出来的一种益生乳酸菌，可在生长代谢过程中产生大量高活力的胆盐水解酶，经过体外牛津杯试验和动物实验证明有降低机体血清胆固醇含量的功效。其降低胆固醇机理是缘于干酪乳杆菌KL1菌株代谢产生的胆盐水解酶(Bile Salt Hydrolase，BSH)，BSH是肠道中的双歧杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属中的多种乳酸细菌在生长过程中产生的代谢产物。大量实验证明，胆盐水解酶能在肝肠循环中将结合胆盐分解，产生氨基酸与溶解度较低的游离胆盐。后者能与胆固醇结合形成沉淀复合物而排出体外，从而降低血清总胆固醇的含量。

早在1963年人们就证实摄取含有某种乳杆菌或双歧杆菌发酵的酸奶具有降低血清胆固醇含量的功效。迄今为止，国内外学者对乳酸菌降胆固醇作用机理的研究尚存在不同观点，主要集中于以下三点：(1)乳酸菌菌体细胞直接吸收同化胆固醇；(2)乳酸菌的胆盐水解酶活性使结合态胆盐降解为游离态胆盐，后者溶解度下降与胆固醇发生共同沉淀作用；(3)其他理论，如吸收同化与共沉淀联合作用。

国内关于干酪乳杆菌的研究主要是在降血脂、抗高血压、治疗过敏性疾病等保健功效上，如上海光明乳业股份有限公司申请的“干酪乳杆菌Bd-II菌株及其在降低血脂方面的应用”，专利申请号为：CN03128995.9；“干酪乳杆菌LC2W菌株及其在抗高血压方面的应用”，专利申请号为：CN03129450.2；景岳生物科技股份有限公司申请的“新的微生物株类干酪乳杆菌GM-080及其治疗过敏相关疾病的用途”，专利申请号为：CN200410038566.X。

虽然国外关于干酪乳杆菌降低血清胆固醇功效的研究也有一项专利报道：Lactobacillus casei bd-II stain and used to reduce blood cholesterol(20060127380)，但是，目前国外有关干酪乳杆菌产胆盐水解酶的内容尚无专利报道。虽然国内有一项“含罗伊氏乳杆菌的功能性酸奶及其制作方法(200310112715.8)”的专利报道，但是国内有关利用降胆固醇及高产胆盐水解酶的干酪乳杆菌应用于功能性酸奶的生产尚未见相关文献报道和专利报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种产胆盐水解酶干酪乳杆菌KL1干粉发酵剂和普通酸奶干粉发酵剂混合发酵功能性酸奶生产技术。

本发明制备功能性酸奶是由具有高效降低胆固醇及高产胆盐水解酶的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KL1干粉发酵剂和普通酸奶干粉发酵剂制得。

一种利用产胆盐水解酶的干酪乳杆菌KL1在功能性酸奶中应用的方法，采用直投法添加酸奶干粉发酵剂的工艺为：干酪乳杆菌KL1菌株干粉发酵剂接种量为0.5‰(W/V，质量体积比浓度)，干酪乳杆菌KL1菌株干粉发酵剂与普通酸奶干粉发酵剂的接种比例为1∶2(W/W，质量分数)。

所述方法中，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KL1分离筛选自吉林、呼和浩特市普通家庭的藏灵菇(又称开菲尔粒)，并已于2006年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号为：CGMCC No.1809(菌株KL1)。在含有碳酸钙和纳他霉素的MRS选择性培养基上，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KL1菌株的菌落大小2～3mm，表面粗糙如雪花状，边缘不规则，无光泽，扁平，灰白色，半透明，菌落有较高黏性；个体形态呈杆状，长短不等，短链状排列，有时菌体呈球形，G⁺无芽孢杆菌。

所述方法中，普通酸奶干粉发酵剂来自于由哈尔滨美华生物技术股份有限公司生产的家家乐直投式酸奶发酵剂。