[发明专利]一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法

权利要求书

1.一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于采取如下步骤：（1）制备蛋白质和电泳样品，并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，（2）将电泳后的胶进行固定、考马斯亮蓝R250染色液初染并脱色，（3）将初染后的胶放入亚甲基蓝染液进行复染并脱色，直至蛋白质和γ-聚谷氨酸条带清晰。

2.据权利要求1所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于步骤（1）中，将分离纯化后的蛋白样品和γ-聚谷氨酸样品用蒸馏水制成适当浓度的溶液，加入等量2x凝胶加样缓冲液，沸水浴5 min，即为电泳样品，根据蛋白和γ-聚谷氨酸样品特点选择电泳胶浓度和电泳条件进行电泳。

3.据权利要求1所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于步骤（2）中，根据胶的厚度，胶板用固定液固定0.5-3 h，加入考马斯亮蓝R250染色液，在水平摇床上染色1-5 h，将胶板取出用脱色液脱色至条带清晰。

4.据权利要求1所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于步骤步骤（3）中，将初染脱色后的胶放入亚甲基蓝染色液中染色0.5-3 h，再放入3%乙酸脱色液或蒸馏水中脱色至条带清晰。

5.据权利要求4所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于亚甲基蓝染色液的配方为1g亚甲基蓝溶于100ml双蒸水中溶解，加入6ml乙酸，用双蒸水定容至200ml，配成0.5%亚甲基蓝染液，室温保存。

6.据权利要求1所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于用于染色的蛋白质和γ-聚谷氨酸先进行单向或双向十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。

7.据权利要求1所述的一种蛋白质和γ-聚谷氨酸同时着色的复染方法，其特征在于可以根据染色结果判定样品中γ-聚谷氨酸的分子量和纯度。