[发明专利]一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法无效
申请号: | 201310055413.5 | 申请日: | 2013-02-21 |
公开(公告)号: | CN103102398A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 刘文;胡巍;吕颖 | 申请(专利权)人: | 山东理工大学 |
主分类号: | C07K14/245 | 分类号: | C07K14/245;C07K1/14 |
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地址: | 255086 山东省淄博*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 纳米 浓缩 分离 dps 蛋白 方法 | ||
1.一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其特征在于采取如下步骤:(1)菌体培养和破碎,获得可溶性菌体蛋白溶液,(2)在菌体可溶性蛋白溶液中加纳米银,(3)将溶液进行高速离心,收集沉淀,Dps与纳米银结合后被离心到沉淀中,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测Dps。
2.根据权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其特征在于步骤(1)中,将菌体在液体培养基中培养至静止期,8000rpm离心10 min收集菌体,用10ml 20mmol/L PBS(pH7.4)缓冲液悬浮菌体,将菌悬液超声波破碎或反复冻融破碎,4 ℃、10 000rpm 离心10-20分钟,取上清,此为菌体可溶性蛋白溶液。
3.根据权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其特征在于步骤(2)中,在菌体可溶性蛋白溶液中加入纳米银,纳米银浓度为5-200ppm,25-37℃条件下震荡孵育30分钟。
4.根据权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其特征在于步骤(3)中,将溶液在4℃、10 000 rpm条件下,离心10-20分钟,收集沉淀,用浓缩胶为4%、分离胶为10%的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测Dps。
5.权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其中所述Dps蛋白可以是通过一个或多个氨基酸的缺失、置换或插入而修饰的蛋白。
6.权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其所述Dps可以是与其它蛋白质或多肽融合形成的Dps融合蛋白。
7.根据权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其所述菌体为细菌或古细菌。
8.权利要求1所述的一种利用纳米银浓缩分离Dps蛋白的方法,其中所述Dps若是基因工程改造后的工程菌分泌表达,则步骤(2)在培养液中加纳米银。
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