[发明专利]一种同时高效制备金针菇多糖和蛋白的方法无效
| 申请号: | 201310055112.2 | 申请日: | 2013-02-21 |
| 公开(公告)号: | CN103113487A | 公开(公告)日: | 2013-05-22 |
| 发明(设计)人: | 贺伟强 | 申请(专利权)人: | 嘉兴职业技术学院 |
| 主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C07K1/14 |
| 代理公司: | 深圳市千纳专利代理有限公司 44218 | 代理人: | 强红刚;唐立平 |
| 地址: | 浙江省嘉兴市场*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 同时 高效 制备 金针菇 多糖 蛋白 方法 | ||
1. 一种同时高效制备金针菇多糖和蛋白的方法,其特征在于该方法包括以下步骤:
(1)原料预处理:干燥金针菇子实体经粉碎后,与蒸馏水按1:30-50的重量比混合成混合液后,备用;
(2)酶解处理:取占混合液重量0.05-0.2%的纤维素酶加入混合液中,调解pH值至4-6,振荡或搅拌下于45-55℃酶解30-90分钟;
(3)微波辅助萃取:将步骤(2)所得酶解液进行微波处理5-20分钟后,离心,得上清液和沉淀物;
(4)醇沉多糖:将步骤(3)所得上清液减压浓缩,加入2-4倍体积的无水乙醇进行醇沉后,离心,冷冻高燥后得金针菇粗多糖;
(5)双水相萃取:将金针菇粗多糖溶于水,得粗多糖溶液,加入离子液体/盐双水相体系中,在温度30-50℃、pH 4-7的条件下震荡30-50分钟,震荡速度为100-200r·min-1,然后静置20-40分钟分层;
(6)金针菇多糖的制备:取出富含无机盐的下层,用截留量为6000的超滤膜除盐,浓缩,冷冻干燥得金针菇多糖;
(7)金针菇蛋白的制备:取出富含离子液体的上层,加入二氯甲烷进行萃取,取有机相真空旋转干燥去除二氯甲烷,得金针菇蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)中微波处理的条件为50-100HZ,300-800W。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)、(4)的离心步骤均在6000rpm离心10分钟。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(5)所述的离子液体/盐双水相体系,其中离子液体为1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体,盐为NaH2PO4和NaCl。
5.根据权利要求4所述的方法, 其特征在于:步骤(5)中粗多糖溶液加入离子液体/盐双水相体系后,使得离子液体的质量分数为10%-25%, NaH2PO4的质量分数为15%-28%,粗多糖浓度为0.2mg/ml,NaCl的质量分数为2%-6%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(7)萃取后的水相被回收离子液体循环使用。
7.根据权利要求1-6任一项所述的方法,其特征在于:步骤(2)所述纤维素酶的活性为160000U/g。
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