[发明专利]一种水蛭肽和制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201310053932.8 | 申请日： | 2013-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN103122030A | 公开（公告）日： | 2013-05-29 |
| 发明（设计）人： | 姜素云 | 申请（专利权）人： | 大连市食品药品检验所 |
| 主分类号： | C07K14/815 | 分类号： | C07K14/815;C07K19/00;C07K1/20;C07K1/16;A61K38/56;A61P7/02 |
| 代理公司： | 大连智慧专利事务所 21215 | 代理人： | 周志舰 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水蛭 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种水蛭肽，其特征在于：水蛭肽rH1-51的序列见序列表SEQ ID No.1或水蛭肽rH1-52的序列见序列表SEQ ID No.2或水蛭肽rH1-51和水蛭肽rH1-52的混合物。
2.如权利要求1所述的序列，其特征在于：水蛭肽rH1-51由51个氨基酸组成，序列见序列表SEQ ID No.1。
3.如权利要求1所述的序列，其特征在于：水蛭肽rH1-52由52个氨基酸组成，序列见序列表SEQ ID No.2。
4.如权利要求1所述的序列，其特征在于：水蛭肽为水蛭肽rH1-51和水蛭肽rH1-52两者的混合物,序列见序列表SEQ ID No.1和2。
5.一种权利要求1所述的水蛭肽的制备方法如下：
(1)大鼠尾静脉注射重组水蛭素，注射剂量为6mg/kg，收集给药后0.5-4h的尿液，以供分离提取代谢产物，所述的重组水蛭素为N端结构为[Ile1,Thr2]-63-脱硫酸基的重组水蛭素；
（2）用凝胶色谱法对空白和样品尿液进行初步分离，色谱条件：凝胶柱流动相：0.02mol/l的PBS溶液，pH7.0，流速0.5-1.0ml/分钟，检测波长为215nm，收集流出液，每分钟收集1管；取收集液；
（3）将凝胶色谱收集到的收集液进行再用C8反相色谱法纯化，色谱条件为：八烷基硅烷键合硅胶柱，进样量20μl，梯度洗脱，乙腈：0.1％TFA25min内从15：85变至45：55，流速0.5ml/min，检测波长为215nm，反复进样，收集水蛭肽rH1-51或水蛭肽rH1-52或两者的混合物；
（4）水蛭肽rH1-51的序列见序列表SEQ ID No.1；水蛭肽rH1-52的序列见序列表SEQ ID No.2。
6.权利要求1所述的水蛭肽在制备抗血栓药物中的应用。
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