[发明专利]一种大豆抗花叶病毒主效基因位点及应用有效
| 申请号: | 201310053813.2 | 申请日: | 2013-02-20 |
| 公开(公告)号: | CN103114145A | 公开(公告)日: | 2013-05-22 |
| 发明(设计)人: | 陈海峰;沙爱华;单志慧;杨中路;张晓娟;张婵娟;陈李淼;陈水莲;邱德珍;周蓉;吴学军;周新安 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
| 地址: | 430062 湖北省武汉市武昌*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 大豆 花叶 病毒 基因 应用 | ||
1.鉴定或辅助鉴定大豆抗花叶病毒性状的方法,包括如下步骤:分别以待鉴定大豆的基因组DNA为模板,用由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两条单链DNA组成的PCR引物对进行PCR扩增,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测所得到的PCR产物,按照下述方法确定所述待鉴定大豆的抗花叶病毒性状:
如果待鉴定大豆的PCR扩增产物在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示为与中豆32的PCR扩增产物大小相同的条带,所述待鉴定大豆为抗花叶病毒大豆或为候选抗花叶病毒大豆,如果所述PCR扩增产物在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示为与中豆29的PCR扩增产物大小相同的条带,所述待鉴定大豆为非抗花叶病毒大豆或为候选非抗花叶病毒大豆;
所述待鉴定大豆选自中豆29×中豆32的杂种后代中的F7及其以后世代的家系。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述聚丙烯酰胺凝胶电泳中,所述聚丙烯酰胺凝胶的浓度为60g/L,所述聚丙烯酰胺凝胶的交联度为5%。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增中先进行10个第一个循环后再进行25个第二个循环,所述第一个循环的引物退火条件为60℃ 30s,所述第二个循环的引物退火条件为55℃ 30s。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述第一个循环的温度程序是:先94℃ 30s,然后60℃ 30s,最后72℃ 1min;所述第二个循环的温度程序是:先94℃ 30s,然后55℃ 30s,最后72℃1min。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述待鉴定大豆选自中豆29×中豆32的杂种后代中的F7至F11家系。
6.权利要求1-5中任一所述的方法的用途,所述用途为1)、2)或3):
1)权利要求1-5中任一所述的方法在大豆育种中的应用;
2)权利要求1-5中任一所述的方法在大豆抗花叶病毒性状的早期预测中的应用;
3)权利要求1-5中任一所述的方法在筛选抗花叶病毒大豆中的应用。
7.鉴定或辅助鉴定大豆抗花叶病毒性状的引物对,名称为GmSSR13-23,由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两条单链DNA组成。
8.含有权利要求7所述的引物对的鉴定或辅助鉴定大豆抗花叶病毒性状的试剂或试剂盒。
9.权利要求7所述的引物对、权利要求8所述的试剂或试剂盒的用途,所述用途为a)、b)或c):
a)权利要求7所述的引物对、权利要求8所述的试剂或试剂盒在大豆育种中的应用;
b)权利要求7所述的引物对、权利要求8所述的试剂或试剂盒在大豆抗花叶病毒性状的早期预测中的应用;
c)权利要求7所述的引物对、权利要求8所述的试剂或试剂盒在筛选抗花叶病毒大豆中的应用。
10.一种大豆抗花叶病毒主效基因位点,其特征在于:所述主效基因位点为qRSC.13-1。
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