[发明专利]一种花生感染黄曲霉毒素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种感染黄曲霉毒素的方法，尤其涉及一种花生感染黄曲霉毒素的方法。

背景技术

黄曲霉毒素（Aflatoxin，AFT）是一类能致癌、致畸、致突变的真菌毒素，1993年被世界卫生组织列为一级致癌物。其中，以AFB₁的毒性最强，其毒性为氰化钾的10倍，为砒霜的68倍。黄曲霉毒素是多种病毒性疾病爆发流行的促进因素，由于黄曲霉毒素作用的靶器官是肝脏，对人畜的危害十分严重。由于受气候因素和农户个体种植、贮藏方式的影响，我国主要粮油作物易受黄曲霉毒素污染，其中以花生和玉米最为严重。我国尤其是南方高温高湿地区、长江中下游地区，梅雨季节有利于霉菌生长及产毒，稻米和玉米较普遍受到黄曲霉毒素的污染。作物收获以后，由于原料粮含水量过高、不良储藏条件，如仓储温度高、湿度大、通风透气条件不良等因素也会导致黄曲霉菌的感染，加剧黄曲霉毒素的形成。黄曲霉毒素性质稳定，一般的食品加工技术，如压榨、碾磨、烹调等条件都不能将其破坏，使得黄曲霉毒素已成为危害我国居民健康的主要因素之一。

据FAO统计，全球约25%的粮油作物受到真菌毒素的污染（主要是黄曲霉毒素）。花生作为我国主要油料作物之一其产量为1604万吨，按5%因黄曲霉毒素污染严重而失去营养和经济价值的比例计算，造成的直接经济损失达到60多亿元。黄曲霉毒素污染食品还严重影响我国的对外出口贸易。花生是我国大宗出口农产品之一，年创汇约8亿美元，而欧盟是主要出口市场。但自2000年，欧盟实施国际上最严格的黄曲霉毒素限量标准和检验要求（AFB₁为2 μg/kg，AFB₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂的总量为4 μg/kg）以来，欧盟以我国少量花生检出黄曲霉毒素超标时有发生为由，不断加强入境检验，启动对我国出口花生产地的调查程序，公布调查报告，多次发布禁令，给我国出口花生等产品造成了很大的困难。2010年，我国出口欧盟食品违例事件共294起，其中花生黄曲霉毒素超标事件80起，占食品总违例事件的27.2%。近期美国、欧盟、日本等国的预警通报显示，我国出口花生及其制品中的黄曲霉毒素存在超标现象：2011年3月7日，美国FDA通报我国安徽1厂家的花生产品疑似含黄曲霉毒素，并采取拒绝进口措施；4月5日，日本通报我国花生产品黄曲霉毒素超标（37μg/kg）； 4月27日，德国通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B₁ = 16.4; Tot. = 18.7 / B₁ = 18.3; Tot. = 21.1 μg/kg ）；西班牙通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B₁ = 30.10; Tot. = 31.90 / B₁ = 59.39; Tot. = 68.58μg/kg）；黄曲霉毒素污染成为我国农产品出口的最大阻碍。黄曲霉毒素污染问题再次引起国内外外贸主管部门、进出口企业、生产经营部门、质量监督检验检疫机构的高度关注。

但是长期以来，花生感染黄曲霉毒素产生的最佳气候条件还不清楚，不能很好的通过栽培和储藏措施来防治黄曲霉毒素。

发明内容

为了解决现有技术中的不足，本发明的目的是提供一种花生感染黄曲霉毒素的方法。

为达到上述目的，本发明所采用的技术手段是：

一种花生感染黄曲霉毒素的方法，包括花生样品的处理、菌种的活化及菌悬液的制备、黄曲霉菌的生长测定、黄曲霉毒素的测定，经过单因素试验确定感染黄曲霉毒素的最佳时间是6天以上，最佳pH是7，最佳相对环境湿度是60%，最佳环境温度是35℃，花生粉最佳水分含量大于8%。

进一步的，所述花生样品的处理是指将花生用多功能料理机打碎，过20目筛，放于紫外灯下灭菌30min。

进一步的，所述菌种的活化及菌悬液的制备是指将菌种接种于PDA培养基上，30℃培养2-3天，用灭菌的蒸馏水清洗黄曲霉孢子，稀释。

进一步的，所述黄曲霉菌的生长测定是指取灭过菌的花生粉，平铺于培养皿中，吸取孢子稀释液点在相应的花生培养基上培养，测定直径的变化，重复做三次取平均值。

进一步的，所述黄曲霉毒素的测定是指取灭过菌的花生粉于三角瓶中，加入孢子稀释液，混匀培养，测定黄曲霉毒素的含量。

更进一步的，所述黄曲霉毒素的测定采用ELISA试剂盒检测。