[发明专利]一种制备malforminC的方法

权利要求书

1.一种制备malforminC的方法，其特征在于：选取代谢产物中含有malforminC的活性菌株，采用需氧微生物发酵方法，分离提取并纯化malforminC的过程。

2.根据权力要求1所述的一种制备malformin C的方法，其特征在于：选取的具有产生malformin C的活性菌株为塔宾曲霉。

3.根据权力要求1所述的一种制备malformin C的方法，其特征在于：采用需氧微生物发酵制备malformin C的步骤为：原始菌种的活化、摇瓶种子的制备、微生物发酵、发酵液的后处理；步骤如下：

(1)培养基种子培养基和微生物发酵培养基中的营养采用常用的碳源和氮源，其中碳源可为葡萄糖、糊精、蔗糖、淀粉、麦芽糖、糖蜜等，氮源可为玉米浆、蛋白胨、热/冷轧花生饼粉、酵母粉、黄豆饼粉，棉籽饼粉，硫酸铵，尿素，等，此外还需要添加一定比例的无机盐，如NH₄Cl、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、ZnSO₄、(NH₄)₂SO₄，等。

(2)微生物发酵工艺：通过摇瓶或发酵罐二级发酵可获得malformin C，培养方法包括：摇瓶种子的制备：灭菌前培养基保持自然pH，灭菌后挖块接种生产菌株斜面菌苔后，于自动旋转摇瓶机上，转数100～400rpm，温度为25～30℃，培养时间为24～48小时。摇瓶微生物发酵：培养基pH自然，灭菌后按照1～10％的接种量转种，于自动旋转摇瓶机上，转数100～300转/分钟，温度为25～30℃，培养时间96～144小时。发酵罐微生物发酵：培养基pH自然，灭菌后按照1-15％的接种量转种，于发酵罐中发酵，转数100-400rpm，通气比0.3～1.5vvm，温度为25～30℃，培养时间96～144小时。

4.根据权力要求1所述的一种制备malformin C的方法，其特征在于：将所述的微生物发酵液用布氏漏斗减压抽滤除去菌丝体，将上清用乙酸乙酯或水饱和正丁醇等体积萃取三次，合并乙酸乙酯或水饱和正丁醇萃取液上层部分，用旋转蒸发仪减压浓缩，用色谱甲醇完全溶解后取出，采用硅胶拌样进行硅胶(200-300目)柱层析，采用氯仿-甲醇梯度洗脱，根据TLC检测分析，合并极性相近部分，得到极性较小的Section E部分。再将Section E部分进行制备液相作进一步纯化，制备液相的流动相为：甲醇∶水＝90∶10；检测波长为203nm，获得单体化合物，经过结构解析，鉴定为malformin C，其化学结构式如下：

malformin C的化学结构式