[发明专利]芹菜籽活性单体的分离纯化制备工艺

权利要求书

1.一种芹菜籽活性单体的分离纯化制备工艺，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将芹菜籽放置在温度为25°C～35°C的条件下进行低温干燥48小时，然后将其粉碎至100目；

（2）将得到的芹菜籽干燥粉末使用超临界萃取装置进行萃取，使用超临界二氧化碳为萃取剂，在压力为25MPa～30MPa 、温度为40°C～50°C、萃取剂流速为40L/h的条件下进行萃取，在压力为6MPa 、温度为30°C～40 °C的条件下进行分离，得到芹菜籽的油状萃取物；

（3）将上一步中得到的芹菜籽的油状萃取物使用高速逆流色谱仪进行分离纯化，溶剂体系是石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，比例为5:5:7:3（v/v)，形成互不相溶的上下两相，以上相作为固定相，固定相的保留率为50%～60%，将1克芹菜籽的油状萃取物溶解于3ml～6ml等量的上相与下相中，进行进样，在分离过程，流速为2ml/min，转速为750rpm～850rpm，检测波长为254nm，根据逆流色谱图谱，收集所需组分；

（4）将上一步收集到的组分利用旋转蒸发仪低温蒸干，蒸干温度30°C～40°C，蒸干后向蒸馏瓶内加入1～3ml色谱纯甲醇溶出，装入已称量好的小样品瓶内，－40°C冷冻干燥至干，称重，分离得高纯度活性单体I（3-n-butyl-4, 5-dihydrophthalide），II （sedanolide），

III 1, 3-Di [(cis)-9-octadecenoyl]-2-[(cis, cis)-9, 12-octadecadienoyl] glycerol。

2. 根据权利要求1所述的芹菜籽活性单体的分离纯化制备工艺，其特征在于：包括如下步骤：

（1）将芹菜籽放置在温度30°C的条件下进行低温干燥48小时，然后将其粉碎至100目；

（2）将得到的芹菜籽干燥粉末使用超临界萃取装置进行萃取，使用超临界二氧化碳为萃取剂，在压力为25MPa ，温度为45°C，萃取剂流速为40L/h的条件下进行萃取，在压力为6MPa ，温度为35°C的条件下进行分离，得到芹菜籽的油状萃取物；

（3）将上一步中得到的芹菜籽的油状萃取物使用高速逆流色谱仪进行分离纯化，溶剂体系是石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，比例为5:5:7:3（v/v)，形成互不相溶的上下两相，以上相作为固定相，固定相的保留率为55%，将1克芹菜籽的油状萃取物溶解于4ml等量的上相与下相中，进行进样，在分离过程，流速为2ml/min，转速为800rpm，检测波长为254nm，根据逆流色谱图谱，收集所需组分；

（4）将上一步收集到的组分利用旋转蒸发仪低温蒸干，蒸干温度30°C～40°C，蒸干后向蒸馏瓶内加入1～3ml色谱纯甲醇溶出，装入已称量好的小样品瓶内，－40°C冷冻干燥至干，称重，分离得高纯度活性单体I（3-n-butyl-4, 5-dihydrophthalide），II （sedanolide），III 1, 3-Di [(cis)-9-octadecenoyl]-2-[(cis, cis)-9, 12-octadecadienoyl] glycerol。

3. 根据权利要求1或2所述的芹菜籽活性单体的分离纯化制备工艺，其特征在于：超临界萃取过程中所使用的萃取剂超临界二氧化碳的纯度为99.999%，所用的石油醚，乙酸乙酯，甲醇为分析纯，水为去离子水。