[发明专利]一种利用嗜热子囊菌内切β-1,4-葡聚糖酶降解壳聚糖制备壳寡糖的方法

权利要求书

1.一种利用嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)内切β-1，4-葡聚糖酶Cel5A降解壳聚糖制备壳寡糖的方法。其特征在于方法步骤为：

(1)以醋酸溶液溶解壳聚糖，配制成浓度为1～6％的壳聚糖溶液，然后用醋酸钠溶液调节pH至5.0～6.0。

(2)将步骤(1)制得的壳聚糖溶液倒入容器中，置于40～55℃的恒温水浴振荡器中，按2～10IU/g底物的加酶量加入内切β-1，4-葡聚糖酶Cel5A进行酶解反应，反应结束后，将所得的酶解液煮沸，使酶灭活，调pH至8.0后离心，将上清液冷冻干燥制得壳寡糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的壳聚糖底物为脱乙酰度为80～95％的壳聚糖。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的内切β-1，4-葡聚糖酶Cel5A是按下述方法得到的：以嗜热子囊菌(Thermobifida fusca)经发酵培养或者高效表达内切β-1，4-葡聚糖酶Cel5A的基因工程菌发酵得到的发酵上清液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的醋酸溶液浓度为1～2％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的醋酸钠溶液的浓度为10～20mM。