[发明专利]一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法无效
| 申请号： | 201310029025.X | 申请日： | 2013-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN103113454A | 公开（公告）日： | 2013-05-22 |
| 发明（设计）人： | 胡建宏;王红;李青旺;王鹏;洪洁赟;王艳风;侯放亮;马国际;贾永宏 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 冷冻 精子 提取 蛋白 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法，其特征在于，包括下列步骤：
1）将冷冻精液解冻后转移到离心管中，在4 ℃、1000×g条件下离心5 min，弃上清液；
2）加入1 ml预冷到4 ℃的PBS洗涤，在4 ℃、1000×g条件下离心5 min，重复3次；
3）向上述沉淀中加200 μl蛋白裂解液，涡旋混匀，使样品充分溶解；
4）静置5 min后，在4 ℃、12000 ×g条件下离心30 min，上清即为精子蛋白溶液。
2.根据权利要求1所述的从牛冷冻精子中提取蛋白的方法，其特征在于，所述的蛋白裂解液是solarbio RIPA组织/细胞裂解液。
3.根据权利要求1所述的从牛冷冻精子中提取蛋白的方法，其特征在于，所述的涡旋的转速是2800 r/min。
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