[发明专利]仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂及其制备工艺

权利要求书

1.一种仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，它由以下重量份的组分组成：糖萜素5.0~55.0，莨菪碱0.005~0.01，血清免疫球蛋白55.0~95.0。

2.权利要求1所述的仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，它由以下重量份的组分组成：糖萜素10.0~35.0，莨菪碱0.005~0.01，血清免疫球蛋白60.0~90.0。

3.权利要求1或2所述的任意一种仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，所述的糖萜素中，按重量百分比计，糖类含量≥30%，三萜皂甙含量≥30%；所述的糖类和三萜皂甙都是从以下重量份的中药材中提取的：白术30~50，苍术20~40，木香15~20，泽泻10~15。

4.权利要求3所述的仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，所述的糖类按照以下提取方法得到：

a、按重量份比例取白术30~50、苍术20~40、木香15~20和泽泻10~15后切碎、洗净，用冷水浸泡2小时至药心充分浸透，再加入中药总重量12倍的水，加热至沸腾后在90℃的情况下，在热回流浓缩工艺下煎煮180分钟同时浓缩得到浓缩药液I；

b、将步骤a制备的浓缩药液，经10000转/分离心20分钟，弃去沉淀物，获得上清液并经负压浓缩，使其形成干物质为25%的浓缩药液II；

c、将步骤b得到的浓缩药液II加4-8倍体积的95%的乙醇，静置过夜，弃去上清液，沉淀物除去乙醇后加水溶解并通过100KD滤膜过滤，除去杂蛋白、内毒素等大分子杂质，收集滤过液再通过1KD纳滤膜过滤，除去有机小分子和无机分子及离子等杂质，被截留的物质稀释后逆向水流透析24小时，然后取出浓缩至相对密度为1.01~1.18克/毫升，再加5倍体积的99%乙醇沉淀，搅拌，静置过夜，3000-5000转/分离心20分钟；沉淀物除去乙醇并经过喷雾干燥，即可制得。

5.权利要求3所述的仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，所述的三萜皂甙按照以下提取方法得到：

i.按重量份比例取白术30~50、苍术20~40、木香15~20和泽泻10~15后切碎、洗净，用乙醇或甲醇提取，回收溶剂，取残渣饼用水溶解或混悬制成水溶液；

ii、往步骤i制成的水溶液中加入石油醚或乙醚，将水溶液中的亲脂物质色素和油质回收，把三萜皂甙留在水溶液中；

iii、往ii步制得的水溶液中加入亲水性较强的有机溶剂丁醇，溶液中亲水性较强的物质继续留在水溶液中，三萜皂甙转移到有机溶剂萃取液中，收集有机溶剂萃取液，减压干燥，制得粗制的三萜皂甙；

iv、将iii步制得的粗制三萜皂甙溶于乙醇或甲醇中，再逐渐滴加乙醚、丙酮或乙醚-丙酮等体积比的混合液，至三萜皂甙从溶液中析出为止，将析出的三萜皂甙干燥即可制得。

6.权利要求1所述的仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，所述的莨菪碱是从洋金花中提取的莨菪碱。

7.权利要求6所述的仔猪大肠杆菌病冻干血清免疫球蛋白制剂，其特征在于，所述的从洋金花中提取莨菪碱的方法如下：按重量份计，取洋金花1份，用30份pH2~3的乙醇渗滤，取渗滤液回收蒸干溶剂，把醇浸膏加水热溶，调整pH值至2~3，滤过，取酸溶液，加入石油醚脱脂，再次获取酸水溶液，氨水调pH值至10，用氯仿萃取，将氯仿萃取液取出，回收氯仿，取萃取余液加于阳离子交换树脂柱上，先以水洗脱除杂，再用0.5%~15%酸液洗脱，收集洗脱液，加碱中和，经脱盐处理，即得莨菪碱。