[发明专利]一种非生物学筛选抗病毒中药有效成分的方法无效
申请号: | 201310016583.2 | 申请日: | 2013-01-17 |
公开(公告)号: | CN103940932A | 公开(公告)日: | 2014-07-23 |
发明(设计)人: | 李剑勇;杨亚军;刘希望;张继瑜;李冰;周绪正;刘玉荣;魏小娟;牛建荣 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/14 |
代理公司: | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人: | 马正良 |
地址: | 730050 甘肃省*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物学 筛选 抗病毒 中药 有效成分 方法 | ||
1.一种非生物学筛选抗病毒中药有效成分的方法,其步骤包括:
a. 奥司他韦分子印迹聚合物及其液相色谱柱的制备
以0.1 mmol奥司他韦为模板分子、0.69 mmol功能单体、5 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂、30%丙烯酰胺和70% 4-乙烯基吡啶作为功能单体、甲苯作为致孔剂、15 mg偶氮二异丁腈作为引发剂,60 ℃油浴热引发聚合反应,所得质地坚硬的白色块状聚合物,对其进行研磨筛分,收集粒径在25~45 μm之间的颗粒,在索氏提取器中,采用甲醇-乙酸,甲醇-乙酸体积比为90 : 10,对其进行洗脱,以除去模板分子奥司他韦;50 ℃减压干燥,在2000 psi的压力下,湿法装填150 mm × 4.6 mm的液相色谱柱,将该色谱柱接入色谱仪,以合适的流动相对其进行洗脱、平衡,直至出现较为平稳的基线;
b. 奥司他韦分子印迹液相色谱柱(OSMIP-LC)对OS和其他化合物的亲和分离
液相色谱条件:Agilent 1200 LC,OS-MIP自制150 mm × 4.6 mm, 25-45 μm液相色谱柱,柱温30℃;流动相为甲醇-乙腈-甲酸,甲醇 : 乙腈 : 甲酸体积比为75 : 25 : 0.01,流速为0.075 ml/min,数据采集软件为MassHunter,压力约170 bar;
质谱条件:Agilent 6410A QQQ电喷雾串联四级杆质谱仪,喷雾器压力30 psi,毛细管电压+4000 V,N2流速10 L/min,温度350 ℃,采集周期为200 ms,模式Scan;
c. 基于奥司他韦分子印迹聚合物与液相色谱、质谱联用,分离筛选鉴定与模板分子活性相似的抗病毒中药有效成分。
2.根据权利要求1所述一种非生物学筛选抗病毒中药有效成分的方法,其特征在于:筛选鉴定所得的抗病毒中药与模板分子的母体结构相同,或完全不同。
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