[发明专利]一种基于微间隙阵列电极检测动物源性样品中沙丁胺醇的方法

权利要求书

1.一种基于微间隙阵列电极检测动物源性样品中沙丁胺醇的方法，其特征在于，所述方法为：在微间隙阵列电极上固定SAL-BSA，将动物源性样品与SAL单克隆抗体混合后加在微间隙阵列电极上，动物源性样品中的SAL与微间隙阵列电极上的SAL-BSA竞争SAL单克隆抗体；然后依次加入碱性磷酸酶标记的二抗和银沉积溶液；测定微间隙阵列电极的电导率，再根据微间隙阵列电极的电导率测定动物源性样品中SAL的浓度。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：

（1）标准工作曲线制作：

a)取等体积的浓度分别为0.1ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL、25.0ng/mL、125.0ng/mL、250.0ng/mL的SAL标准品，将上述各SAL标准品分别与SAL单克隆抗体混合后加入到微间隙阵列电极上，37℃反应0.5～1.5h，SAL标准品SAL单克隆抗体混合物中SAL标准品与SAL单克隆抗体的体积相等；

b)然后在微间隙阵列电极上加入与SAL标准品SAL单克隆抗体混合物等体积的稀释好的碱性磷酸酶标记的二抗，37℃反应25～35min；

c)再在微间隙阵列电极上加入银增强溶液37℃避光反应10～20min，洗净吹干；

d)将微间隙阵列电极一端与CHI760B型电化学工作站的工作电极连接，CHI760B型电化学工作站的对电极与CHI760B型电化学工作站的参比电极复合后再与微间隙阵列电极的另一端连接；

e)采用线性扫描伏安法在0-50mV电位范围检测，记录微间隙阵列电极电流随电位变化的响应曲线，并计算其电导值，所述响应曲线的横坐标为电压，纵坐标为电流，电导值=电流/电压；

f)根据不同浓度的SAL标准品对应的微间隙阵列电极的电导值获得标准工作曲线，所述标准工作曲线的横坐标为SAL的浓度，单位为ng/ml，纵坐标为1-S/S₀，S₀为检测空白样品的电导值，S为检测的含不同浓度SAL标准品的电导值；

（2）检测动物源性样品中的SAL：

a)取动物源性样品，将样品与其等体积的SAL单克隆抗体混合后加入到微间隙阵列电极上，37℃反应0.5～1.5h；

b)然后在微间隙阵列电极上加入与样品SAL单克隆抗体混合物等体积的稀释好的碱性磷酸酶标记的二抗，37℃反应0.5～1.5h；

c)再在微间隙阵列电极上加入银增强溶液37℃避光反应10～20min，洗净吹干；

d)按照步骤（1）同样的步骤将微间隙阵列电极与CHI760B型电化学工作站连接，并计算微间隙阵列电极的电导值；

e)再根据该电导值与标准工作曲线比对，求得样品中SAL的浓度。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，在制作标准工作曲线前对微间隙阵列电极进行预处理：用无水乙醇清洗微间隙阵列电极；将微间隙阵列电极浸入1M的NaOH溶液中25～35min，然后用超纯水清洗该微间隙阵列电极，吹干；再将微间隙阵列电极浸入SAL-BSA溶液中，4℃过夜后用超纯水清洗微间隙阵列电极，吹干，于4℃保存。

4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述微间隙阵列电极由常规光刻印刷法制作。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述微间隙阵列电极为叉指式双电极，正负电极均为两个梳形金电极，梳形金电极的梳齿宽为80～120μm，梳齿间隙为15～25μm。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述梳形金电极的梳齿宽为100μm，梳齿间隙为20μm。