[发明专利]一种橙酮类化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取技术领域，具体涉及一种橙酮类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

烟草是人类所认识的各种植物中含化学物质最多的一种，经过几十年的研究，人们目前从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。香料烟又称土耳其烟、东方型烟，原产于地中海沿岸国家，是红花烟草（Nicotianatobacum）的一种特殊烟草类型。由于香料烟具有浓郁芳香和纯净吃味的品质特点，在烟草制品中有着特殊的应用价值，是生产混合型、外香型和东方型卷烟及斗烟丝的重要原料之一。尤其是混合型卷烟具有劲足、味浓、用料广泛、可有效降低焦油含量从而减轻吸烟对人体健康的危害特点，深受吸烟者的青睐，成为当今世界流行的卷烟类型。目前，香料烟在云南保山地区有大面积种植。香料烟中黄酮类化合物的含量很丰富，黄酮是一类自然界中广泛存在的生物活性物质，由于植物黄酮成分结构类型多，立体化学复杂，具有多种生物活性，国内外对该领域的研究十分活跃；橙酮属于稀有黄酮类化合物，由于其显著的生物活性，无论是天然存在的，还是人工合成得到的橙酮类化合物，都引起了化学家的广泛关注。因此，深入开发香料烟中有利用价值的化学成分作为先导性化合物，如黄酮类化合物，尤其是橙酮，这样除了作为卷烟消费外，烟草的社会价值会得到更大提升，更具深远意义。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种橙酮类化合物，第二目的在于提供该化合物的制备方法，第三目的在于提供该化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的橙酮类化合物是从香料烟中提取出来的，其4′位为乙酰基，结构式为：

橙酮类化合物的命名为：4′-乙酰基-5-羟基-6-甲氧基橙酮（4′- acetyl-5-hydroxy-6- methoxyaurone）。

本发明的第二目的是这样实现的，所述的橙酮类化合物制备方法包括原料处理、超声提取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离、凝胶柱层析，具体为：

A、原料处理：取香料烟全株，粗粉碎20~40目；

B、超声提取：以85~95%的乙醇为溶剂，超声提取3~5次，每次30~60min，每次乙醇用量为4~6L，将提取液合并、过滤，减压浓缩成浸膏；

C、硅胶柱层析：将浸膏用重量比1~2倍量的丙酮溶解，用80-100目的硅胶拌样后上硅胶柱，以体积配比为20:1~10:10的氯仿-乙醇溶液梯度洗涤，分别收集各部分的洗脱液并浓缩，用TLC监测合并相同的部分；

D、高压液相色谱分离：取体积配比9:1部分的洗脱液，以45~55%的乙醇为流动相，以规格为20 mm×250 mm、5 μm的C₁₈制备柱为固定相，流速为15ml/min，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样200μL，收集18.6 min的色谱峰，多次累加后蒸干，得到产物a；

E、凝胶柱层析：产物a用重量比1~2倍量的纯乙醇溶解后上Sephadex LH-20凝胶柱，以纯乙醇溶液洗脱，分瓶收集，洗脱液的0.8-0.9 L部分浓缩产物即为所述的橙酮类化合物。

本发明的第三目的是这样实现的，所述的橙酮类化合物在制备抗白血病细胞和/或人乳腺癌细胞药物中的应用。

本发明的橙酮类化合物是首次从香料烟中被分离出来，采用核磁共振、质谱、红外光谱、紫外光谱等波普数据确认了其分子式和结构。本发明的橙酮类化合物制备方法简单易行，以乙醇为溶剂，对环境污染小、安全环保；化合物结构简单，人工合成也易于实现。该化合物进行抗肿瘤活性筛选，发现对白血病细胞（NB4）和人乳腺癌细胞（MCF7）有明显的抑制作用，IC₅₀值分别为2.6μM和1.8μM，说明该橙酮类化合物可以作为抗癌药物的先导化合物，对于开发抗肿瘤药物是十分有意义的。

附图说明

图1为本发明的制备方法工艺流程图；

图2为本发明化合物的核磁共振氢谱（¹H NMR）图；

图3为本发明化合物的核磁共振碳谱（¹³C NMR）图；

图4为本发明化合物的主要HMBC相关图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。

本发明所述的橙酮类化合物是从香料烟中提取出来的，其4′位为乙酰基，结构式为：