[发明专利]以黄皮属植物中的咔唑生物碱为抗肿瘤活性成分的药物组合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.药物组合物，其中含有治疗有效量的如下结构式所示的黄皮属植物中的咔唑生物碱clausine D（1）、6-methoxyheptaphylline（2）、mafaicheenamine C（3）、claulansine G（4）或其药理学上容许的盐和药学上可接受的载体，

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2.制备权利要求1中所述咔唑生物碱的方法，取黄皮属植物的根茎，经干燥、粉碎后，用甲醇回流充分提取；将甲醇浸膏加水混悬后，依次用乙酸乙酯和正丁醇充分萃取；乙酸乙酯部分反复用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、RP-18和HPLC等各种层析柱分离纯化，再结合TLC检测方法即得到咔唑生物碱类化合物。

3.制备权利要求1中所述咔唑生物碱clausine D（1）、6-methoxyheptaphylline（2）、mafaicheenamine C（3）和claulansine G（4）的方法，取黄皮的根茎，经干燥、粉碎后，用甲醇回流提取3次，时间为每次4小时，提取液经减压浓缩得甲醇浸膏；将甲醇浸膏加水混悬后，依次用乙酸乙酯和正丁醇充分萃取，等体积各萃取三次，回收溶剂得到乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水部分；将乙酸乙酯部分经硅胶柱层析，用100:0, 95:5, 90:10的氯仿/甲醇梯度洗脱，薄层层析，结合TLC检测方法，根据咔唑生物碱极性的不同合并为七个组分Fr.1 - Fr.7；以下的每一步骤都须结合TLC检测方法来进行分离纯化，Fr.2用60目的聚酰胺拌样，以甲醇和水做流动相经中压MCI柱层析10%-100%梯度洗脱除去色素，然后硅胶柱层析，用9:1-7:3石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱分离得到四个亚组分Fr.2-1 - Fr.2-4；Fr.2-2再经硅胶柱层析以9:1-7:3石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱分离得到四个亚组分Fr.2-2-1 - Fr.2-2-4；Fr.2-2-1经两次硅胶柱层析，以9:1-7:3石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂梯度洗脱除去一部分杂质，得到的样品浓缩后再经Waters OBD 制备柱60%乙腈/水等度洗脱纯化，纯化出来的样品浓缩后再以丙酮为溶剂重结晶得到化合物6-methoxyheptaphylline（2）；Fr.6经硅胶柱层析，以9:1-7:3石油醚/丙酮为洗脱剂梯度洗脱初步除去色素，然后再经中压MCI柱层析，以10%-60%甲醇/水为流动相梯度洗脱进一步除去色素，然后再用中压RP-18柱层析，以5%-70%甲醇/水为流动相梯度洗脱得到四个亚组分Fr.6-1 - Fr.6-4；Fr.6-1经硅胶柱层析，以20:1氯仿/丙酮为洗脱剂等度洗脱进一步分离得到三个亚组分Fr.6-1-1 - Fr.6-1-3；Fr.6-1-1经Sephadex LH-20层析，1:1的氯仿/甲醇为洗脱剂等度洗脱得到的样品浓缩后再经硅胶柱层析，以9:1石油醚/丙酮为洗脱剂等度洗脱分离得到化合物claulansine G（4）；Fr.6-1-2经硅胶柱层析，以20:1氯仿/乙酸乙酯为洗脱剂等度洗脱分离得到含有生物碱的样品，再经Waters OBD 制备柱，以48%的乙腈/水（含0.6%的三氟乙酸）为洗脱剂等度洗脱得到化合物mafaicheenamine C（3）；Fr.6-3经硅胶柱层析，以9:1石油醚/丙酮为洗脱剂等度洗脱得到含有生物碱的样品，该样品以丙酮为溶剂重结晶得到化合物clausine D（1）。

4.以权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐为有效成分的肿瘤细胞生长抑制剂。

5.抗肿瘤药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐和药学上可接受的载体。

6.权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐在制备肿瘤细胞生长抑制剂中的应用。

7.权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐在制备治疗抗肿瘤相关疾病的药物中的应用。

8.权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐在制备胃癌、宫颈癌、肺癌细胞生长抑制剂中的应用。

9.权利要求1中所述的咔唑生物碱或其药理学上容许的盐在制备治疗胃癌、宫颈癌、肺癌的药物中的应用。