[发明专利]基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法

权利要求书

1.一种基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

（1）制备铂纳米颗粒模拟酶；

（2）将铂纳米颗粒模拟酶标记到抗体上制成铂标抗体纳米探针；

（3）将已包被在酶标微孔板上的抗体、待测样品以及铂标抗体纳米探针通过夹心型免疫分析反应模式形成免疫复合物；将所述免疫复合物与游离的铂标抗体纳米探针进行分离；

（4）加入铂纳米颗粒模拟酶的最适底物液，用酶标仪检测各个微孔的吸光度值。

2.根据权利要求1所述的基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法，其特征在于：步骤（1）和（2）所述的铂纳米颗粒模拟酶是通过硼氢化钠还原氯铂酸钾得到的；所述的铂纳米颗粒模拟酶粒径为3~5nm，其表面带负电荷。

3.根据权利要求1所述的基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法，其特征在于：步骤（2）所述铂纳米颗粒模拟酶与抗体的结合为正负电荷相吸作用结合、疏水作用结合和化学键作用结合。

4.根据权利要求1所述的基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法，其特征在于：步骤（3）所述酶标微孔板是高亲和力的96孔聚苯乙烯微孔板；所述待测样品为大分子目标物；所述夹心型免疫分析模式的完成采取两步法：即待测样品、包被在酶标微孔板上的抗体混合发生免疫反应形成一种免疫复合物，再与铂标抗体纳米探针混合发生免疫反应形成免疫复合物。

5.根据权利要求1所述的基于铂纳米颗粒模拟酶的免疫分析方法，其特征在于：步骤（4）所述铂纳米颗粒模拟酶的最适底物液为含有浓度为7.63M 的过氧化氢和浓度为0.921mM的3,3',5,5'-四甲基联苯胺的柠檬酸钠-磷酸缓冲液；所述柠檬酸钠-磷酸缓冲液的pH 值为4.0。