[发明专利]哺乳动物的胚胎或受精卵的非冻结低温保存方法有效
申请号: | 201280075376.8 | 申请日: | 2012-08-21 |
公开(公告)号: | CN104685050B | 公开(公告)日: | 2021-09-17 |
发明(设计)人: | 出田笃司;青柳敬人 | 申请(专利权)人: | 全国农业协同组合连合会 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073;C12N5/075 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 张桂霞;杨思捷 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 哺乳动物 胚胎 受精卵 冻结 低温 保存 方法 | ||
1.哺乳动物的胚胎或受精卵的保存方法,该方法包括:将哺乳动物的胚胎或受精卵浸在含有20~80%V/V的血清和15~100mM的Good’s缓冲液的培养基中,在非冻结低温下保存上述胚胎或受精卵,其中,上述Good’s缓冲液为选自HEPES、TES、PIPES、MOPS和EPPS的至少一种,上述非冻结低温为-1℃~15℃的温度,上述胚胎或受精卵是未经过冻结的胚胎或受精卵。
2.哺乳动物的胚胎或受精卵的保存方法,该方法包括:在运输胚胎或受精卵的期间中,将哺乳动物的胚胎或受精卵浸在含有20~80%V/V的血清和15~100mM的Good’s缓冲液的培养基中,在非冻结低温下保存上述胚胎或受精卵,其中,上述Good’s缓冲液为选自HEPES、TES、PIPES、MOPS和EPPS的至少一种,上述非冻结低温为-1℃~15℃的温度。
3.权利要求1或2所述的方法,其中,上述Good’s缓冲液为选自HEPES、PIPES和MOPS的至少一种。
4.权利要求1或2所述的方法,其中,上述Good’s缓冲液为HEPES。
5.权利要求1或2所述的方法,其中,上述培养基为不含具有细胞延寿活性的肽的培养基。
6.权利要求1或2所述的方法,其中,上述培养基为不含下述(a)和(b)中的任一种肽的培养基:
(a) 肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示;
(b) 肽,该肽与SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列具有80%以上的同源性、且具有细胞延寿活性。
7.权利要求1或2所述的方法,其中,上述血清为牛血清。
8.权利要求1或2所述的方法,其中,上述哺乳动物为牛。
9.权利要求1或2所述的方法,其中,上述胚胎为桑椹期~胚泡期的胚胎。
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