[发明专利]抗PHF‑tau抗体及其用途

说明书

本专利申请要求于2011年12月20日提交的美国临时申请号61/577,817的权益，所述美国临时申请的全部内容以引用方式并入本文。

技术领域

本发明涉及抗PHF-tau抗体及其制备和使用方法。

背景技术

阿尔茨海默氏病(AD)是退行性脑病症，其特征在于渐进性的记忆、认知、推理、判断和情感稳定性的丧失，所述丧失逐渐导致极度精神衰退和最终的死亡。AD是老年人中进行性精神障碍(痴呆)的非常常见的病因，并且被认为是美国第四大最常见的医学死因。AD已在全世界的种族群体中观察到，并且代表目前和未来的主要公共健康问题。

患有AD的个体的脑显示出称作老年(或淀粉样蛋白)斑、淀粉样蛋白血管病(淀粉样蛋白在血管中沉积)和神经原纤维缠结的特征性病变。一般在具有AD的患者中对于记忆和认知功能重要的人脑几个区域中发现大量这些病变，特别是淀粉样斑块和成对螺旋细丝的神经原纤维缠结。

AD及其他几种神经退化性疾病中的神经原纤维变性的主要蛋白质组分是高度磷酸化形式的微管相关蛋白tau。开发预防或清除tau聚集的治疗剂一直关注多年，但候选药物包括抗聚集化合物和激酶抑制剂只是刚刚进入临床测试(Brunden等人Nat Rev Drug Discov8：783-93，2009)。

近来，在转基因tau小鼠模型中已产生tau的主动和被动免疫接种可具有治疗潜力的临床前证据(Chai等人J Biol Chem 286：34457-67，2011，Boutajangout等人J Neurochem 118：658-67，2011，Boutajangout等人J Neurosci 30：16559-66，2010，Asuni等人J Neurosci 27：9115-29，2007)。tau蛋白病变(tauopathy)传播和蔓延假设近来已得到描述，并且基于人脑中的tau蛋白病变进展的Braak阶段和在临床前tau模型中的tau聚集体注射 后的tau蛋白病变蔓延(Frost等人J Biol Chem 284：12845-52，2009，Clavaguera等人Nat Cell Biol 11：909-13，2009)。因此，存在预防tau聚集和tau蛋白病变进展以治疗AD及其他神经退化性疾病的治疗剂的需要。

附图说明

图1显示了多种抗tau抗体对标记AT8的竞争。

图2显示了多种抗tau抗体对标记PT1的竞争。

图3显示了多种抗tau抗体对标记PT3的竞争。

图4显示了多种抗tau抗体对标记AT100的竞争。

图5显示了多种抗tau抗体对标记HT7的竞争。

图6(A)如该图中所示，用盐水、小鼠IgG1、PT3或AT8处理的5月龄雌性P301L转基因动物，或来自未经处理的非转基因动物(B6)的脑干匀浆物(级分P1)中的磷酸化tau的分析。使用AT8(左图)或AT100(右图)作为捕获抗体，随后为生物素化的HT7和抗生物素蛋白-HRP来完成ELISA。ELISA信号标绘为AD脑匀浆物的相对量(ng/ml)，所述AD脑匀浆物提供与来自非转基因动物(B6)的平均样品相同的ELISA信号。数据连同平均值+/-S.D一起个别进行标绘。指示了PT3和IgG1处理的动物之间的差异的p值。(B)使用AT100来自IgG1或PT3处理的动物的脑干匀浆物级分P1的蛋白质印迹。显示了来自用IgG1(IgG1-1至IgG1-10)处理的10只动物和用PT3(PT3-1、PT3-2、PT3-7至PT3-10)处理的7只动物的匀浆物的信号。肌动蛋白用作装载对照。

图7如该图中所示，源自用PT3或同种型对照(IgG)处理的5月龄雌性P301L转基因动物的十二烷基肌氨酸钠可溶性(pT4可溶性)皮质匀浆物中的总tau水平，十二烷基肌氨酸钠不溶性(pT4不溶性)皮质匀浆物中的总tau水平，和十二烷基肌氨酸钠不溶性(AT8不溶性)皮质匀浆物中的磷酸化tau水平。水平显示为连同平均值+/-SD一起个别标绘的来自ELISA的信号测量。样品1m inj是源自用tau聚集体注射的P301L小鼠脑的阳性对照样品。

发明内容