[发明专利]佐剂化合物

说明书

技术领域

本发明涉及新的适合作为疫苗组合物中的佐剂的化合物，制备所述化合物的方法以及包含所述化合物的组合物。

背景技术

几十年来一直主要使用接种疫苗策略来形成保护性免疫以保护患者在与传染原接触后不患上疾病。为了这个目的，已经将减毒病原体、死病原体或破坏的病原体、病原体制剂、或者纯化或重组的病原体组分给予患者，以激发针对各个病原体的抗原组分的特异性免疫应答。刺激这样的免疫应答的组分，可以是例如病原体特异性的蛋白、多糖或脂质。可通过同时给予佐剂来进一步刺激针对病原体中包含的抗原的特异性免疫应答。本领域已知，佐剂可加速、延长针对一种或多种所述抗原的特异性免疫应答或提高针对一种或多种所述抗原的特异性免疫应答的质量，它目前被用作疫苗的一部分。所提出的佐剂的优点包括它们具有以下能力：1)指导并优化适用于疫苗的免疫应答；2)使得疫苗能够进行粘膜递送；3)促进细胞介导的免疫应答；4)增强较弱的免疫原(例如高度纯化的抗原或重组抗原)的免疫原性；5)降低提供保护性免疫所需的抗原量或免疫频率；6)改善免疫应答降低或减弱的个体(例如新生儿、老年人和免疫功能不全的患者)中疫苗的效力。

佐剂具有不同的作用机制。一组佐剂通过toll样受体起作用。Toll样受体(TLR)识别微生物组分的特定模式，特别是来自病原体的那些，并调节先天性免疫和获得性免疫的激活。未成熟的树突细胞响应这些微生物组分而成熟。迄今为止，已经鉴定了TLR家族的13个成员。TLR由吞噬细胞(例如单核细胞、巨噬细胞和树突细胞)表达。通过配体结合来激活TLR可在MyD88依赖性途径(NF-[κ]β)或MyD88非依赖性途径(IFR-3)中产生信号转导事件。一种已知的与toll样受体2(TLR2)相互作用的脂肽佐剂是所谓的Pam3Cys-脂肽的佐剂。根据Renate Spohn et al.(Vaccine22(2004)2494-2499)的记载，发现Pam3Cys-SK4变体是用于在小鼠中引发细胞免疫应答的最有效添加剂。Pam3Cys-SK4的另一优点是其具有化学稳定性，可以高质量来大批量生产。一种Pam3Cys-脂肽Pam3Cys—Ser-(Lys)4(Aca-Aca-生物素).2三氟乙酸酯可商购自例如Enzo Life Sciences International Inc,Plymouth Meeting,PA,USA可用作佐剂。

WO-A-2009/072767记载了Pam3Cys-SK4和聚肌胞苷酸(polyinosinic:polycytidylic acid)的混合物作为疫苗的佐剂的用途。

本发明的目的是改善Pam3Cys样脂肽的免疫应答。

发明内容

本发明涉及改良的Pam3Cys样脂肽，其诱导更好的免疫应答。新化合物用式(1)表示：

其中R¹和R²各自独立地为具有最多达17个选自碳、氮、氧和硫的原子的支链或直链的基团，n为0至18，包含18，Y为硫或硒，X为S或O，R是–OH或者包含一个或多个肽、一个或多个核酸、一个或多个抗体或其组合的有机基团。优选地，R¹和R²各自独立地为具有最多达17个碳原子，优选10-17个碳原子的支链或直链烷基。优选地，R¹和R²各自独立地为具有最多达17个碳原子，优选10-17个碳原子的支链或直链烷基，并且Y为硫。

申请人发现，与已知的Pam3Cys-SK4相比，本发明的化合物能够通过功能性地刺激TLR2而诱导改善的免疫应答。不希望囿于以下理论，申请人认为，通过将所述已知化合物的N末端棕榈酰部分中的桥连-CH₂-基团替换为-NH-桥连基团，可达到更高的刺激水平。所述化合物的脂肪链与二聚体受体的轮廓分明的袋(pocket)相适，并认为通过纳入桥连–NH-基可生成氢桥。这使得所述配体与所述受体更紧密地结合，这又进而有利于实现所需的佐剂活性。

附图说明

图1示出了现有技术中的Pam3Cys-SK4化合物和本发明化合物的两个实例。

图2示出了用于制备本发明的化合物的合成方案。

图3示出了实验结果，其中将TRL2转染的HEK细胞和树突细胞与现有技术的化合物及本发明的化合物进行孵育。