[发明专利]细胞分离方法有效
| 申请号: | 201280057552.5 | 申请日: | 2012-11-20 |
| 公开(公告)号: | CN103946373B | 公开(公告)日: | 2016-11-16 |
| 发明(设计)人: | B·考林;V·胡珀特 | 申请(专利权)人: | 美天旎生物技术有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
| 代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平;徐志明 |
| 地址: | 德国贝尔吉*** | 国省代码: | 德国;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 细胞 分离 方法 | ||
1.一种用于从含有所需细胞、红细胞和不需要的细胞的样品中富集和/或回收所需细胞的方法,包括:
a)将所述样品与组合物接触,其中所述组合物包含:
i)红细胞聚集试剂,
ii)至少一种与磁性颗粒偶联的抗原识别部分,其中具有所述至少一种抗原识别部分的所述颗粒特异性地结合对于一种或多种的不需要的细胞成分特异性的至少一种抗原;
b)对所述样品同时应用
i)用于红细胞沉降的重力沉降;和
ii)磁场梯度以用于固定所述磁性颗粒,从而产生沉淀和上清液相,并
c)从所述上清液相回收所需的细胞。
2.根据权利要求1的方法,其中所述组合物另外包含iii)一种或多种的修饰所述所需细胞的细胞修饰剂。
3.根据权利要求1或2的方法,其中所述颗粒的大小在100nm至1400nm之间。
4.根据权利要求1至3中任一项的方法,其中所述至少一种抗原识别部分识别红细胞的细胞表面上的抗原,且还识别在至少一种其它的不需要的细胞成分的细胞表面上的抗原。
5.根据权利要求1至4中任一项的方法,其中所述红细胞凝集试剂选自于羟乙基淀粉、甲基纤维素或羟丙基甲基纤维素(HPMC)。
6.根据权利要求1至5中任一项的方法,其中所述至少一种与磁性颗粒偶联的抗原识别部分是抗体。
7.根据权利要求1至6中任一项的方法,其中所述颗粒与两种或更多种抗原识别部分偶联,并且其中具有所述两种或更多种抗原识别部分的所述颗粒特异性地结合对于不同的不需要的细胞成分特异性的至少两种抗原。
8.一种组合物,其包含
i)红细胞凝集试剂,
ii)一种或多种单-和/或多-特异性磁性颗粒的集合,至少一种抗原识别部分与所述颗粒偶联,其中具有所述至少一种抗原识别部分的所述颗粒特异性地结合对于一种或多种不需要的细胞成分特异性的至少一种抗原。
9.根据权利要求8的组合物,其中所述组合物还包含iii)一种或多种修饰所述的所需细胞的细胞修饰剂。
10.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括对于粒细胞和血小板的抗原识别部分之抗原特异性。
11.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD2、CD14、CD15、CD36、CD43、CD56、CD61、aIgE的抗原识别部分之抗原特异性。
12.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD11b、CD14、CD15、CD19、CD36、CD56、CD61、CD123、aIgE的抗原识别部分之抗原特异性。
13.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD3、CD4、CD14、CD15、CD19、CD36、CD61、CD123、CD193、aIgE、aTCRab的抗原识别部分之抗原特异性。
14.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD8、CD11b、CD14、CD15、CD19、CD36、CD56、CD61、CD123、aIgE、aTCRg/d的抗原识别部分之抗原特异性。
15.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD4、CD11b、CD14、CD15、CD19、CD36、CD56、CD61、CD123、aIgE、aTCRg/d的抗原识别部分之抗原特异性。
16.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD11b、CD14、CD15、CD19、CD36、CD56、CD61、CD123、aIgE、aTCRg/d的抗原识别部分之抗原特异性。
17.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD11b、CD14、CD15、CD19、CD36、CD56、CD61、CD123、aIgE、aTCRab的抗原识别部分之抗原特异性。
18.根据权利要求8或9的组合物,其中所述集合包括一种或多种,优选所有的,选自于CD61、CD2、CD15、CD19、CD56、CD304、aIgE的抗原识别部分之抗原特异性。
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